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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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病毒5型PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
  • 貨號(hào):BKP3790
  • 價(jià)格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-11
  • 更新日期: 2024-11-26
產(chǎn)品詳請(qǐng)
產(chǎn)地 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
品牌 帛科
貨號(hào) BKP3790
用途 公司產(chǎn)品僅用物科研
包裝規(guī)格 50次
純度 %
CAS編號(hào)
是否進(jìn)口

本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
【產(chǎn)品名稱】: 病毒5PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
【英文名稱】: Hepatitis C Virus(HCV)5RTPCR
【貨號(hào)】: BKP3790
【儲(chǔ)存條件及有效期】:
-20
避光保存,避免反復(fù)凍融,有效期6個(gè)月。
【適用儀器】:
ABI7300
ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運(yùn)輸】
u
樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
u
存放:樣本在2~8條件下保存應(yīng)不超過(guò)72h,-70以下可長(zhǎng)期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(最多凍融3次);
u
運(yùn)輸:采用冰壺或泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑,如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒,也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。

組成及試劑配制:

酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2
、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml 200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3
樣品稀釋液:1×20ml。
4
、 檢測(cè)稀釋液A1×10ml。
5
檢測(cè)稀釋液B1×10ml。

病毒5PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過(guò)選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2)
靈敏度高
PCR
產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測(cè)中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3)
簡(jiǎn)便、快速
PCR
反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在24 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無(wú)放射性污染、易推廣。
(4)
對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。

IFNAR1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IFNAR1 / IFNAR 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) TBHB3-羥基-2,4,6-三溴本酸sigma

CL-0205Sf-9(昆蟲(chóng)細(xì)胞)5×106cells/瓶×210-脫酰基巴卡丁III 10-Dqccqtylbcccctin III 3981-86-2

Dami細(xì)胞,巨核細(xì)胞 人分泌A2抗體B細(xì)胞,BB7.2細(xì)胞 人導(dǎo)管癌細(xì)胞;HCC382-本加醋酯 Mqthyl o-toluctq 89-71-4

A673(人橫紋肌瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2L-絲酸鹽酸鹽,英文名或英文縮寫:H-Ser-OmeoHCl,級(jí)別:特,98%,規(guī)格:5

PVRL2 Others Human CD112 / Nectin-2 / PVRL2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 59-14-35--2-脫氧尿苷(-20)Broxuridine
非洲綠猴腎細(xì)胞;VERO銀杏酸C15:1Ginkgolic Acid C15:1質(zhì)量規(guī)格:HPLC80%,美國(guó)進(jìn)口

ICAM2 Others Human ICAM-2 / CD102 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 銀杏酸C13:0,白果酸C13:0Ginkgolic Acid C13:0質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS4BAZD9291AZD-9291(free base)質(zhì)量規(guī)格:>98%,EGFR抑制劑

KCT2 Others Human KCT2 / C5orf15 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) AZD9291 MesylateAZD-9291 mesylate質(zhì)量規(guī)格:>98%,EGFR抑制劑

CL-0061CHO(倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞)5×106cells/瓶×2乳酸鏈球菌素;乳鏈菌肽;尼生素Nisin質(zhì)量規(guī)格:BR,效價(jià)>900IU/MG
病毒5PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)RSC96(大鼠雪旺細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2醋氯芬酸(標(biāo)準(zhǔn)品)Aceclofenac質(zhì)量規(guī)格:UV法含量測(cè)定

Gibco 10902088 Sf-900 II SFM 1000mlTG101209TG-101209;TG 101209質(zhì)量規(guī)格:>98%,選擇性JAK2抑制劑

人角膜細(xì)胞總RNAHK NA鹽酸阿扎司瓊(標(biāo)準(zhǔn)品)Azasetron Hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定

小鼠顆粒神經(jīng)元(MGC)(1×106)鹽酸普萘洛爾(標(biāo)準(zhǔn)品)Propranolol Hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:溶出度檢查

貓?jiān)醇?xì)胞美他多辛(標(biāo)準(zhǔn)品)Metadoxine質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測(cè)定
人神經(jīng)少突起前質(zhì)膠質(zhì)細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLMalonicacid胡蘿卜酸50毫克BR

JB6-C30細(xì)胞,小鼠皮膚細(xì)胞 J82(細(xì)胞) 犬腎細(xì)胞;MDCK/IgR3--1-炳醇 3-BroMo-1-propcnol 67-18-9

EFNA1 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-A1 / EFNA1 蛋白 (His 標(biāo)簽)litxiumacetatedihydrate醋酸1004N99.99%

CAL-27(人舌鱗癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 原代骨細(xì)胞特制無(wú)血清添加劑Many types of cells包裝:1mlBentonite膨潤(rùn)土5BR,99%

人骨骼肌成肌細(xì)胞HSkMM109-76-21,3-二基1,3-Diaminopropane

PCR檢測(cè)試劑盒:

病毒5PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū) ()RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說(shuō)明書(shū)的流程進(jìn)行。
(1)
Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min
(2)
移入1.5mlEP管中,4oC 13000g離心10min
(3)
上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)
加入0.2ml氯仿/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4oC 12000g
離心15min。
(6)
仔細(xì)吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)
加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min
(8)4oC 12000g
離心10min,EP管底部可見(jiàn)白色沉淀物。
(9)
棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g
離心5min。
(11)
吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)
半透明時(shí)將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20oC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)
所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)
取所提取的總RNA1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s18s兩條rRNA


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