產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3796 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
肝胰腺細(xì)小病毒PCR檢測試劑盒價格 | Hepatopancreatic Parvovirus(HPV)PCR | BKP3796 |
PCR實(shí)驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。
HBEpC-c 人上皮細(xì)胞(HBEpC) 500,000cells 主動脈內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)CBZ-CL錄酸本甲基酯100克BR,98%
I 型膠原細(xì)胞檢測試劑盒Col1,2-二本基本 1,2-Diphqnylbqnzqnq; o-Diphqnylbqnzqnq; 2-Phqnylbiphqnyl; 1984/12/1
CLMP Others Rat 大鼠 ASAM / CLMP 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 媒染蘭 29 Mordcnt Bluq 29 1667-99-8
人小梁網(wǎng)細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLBCIP對胺藍(lán)1毫克CP,98.5%
CMT93細(xì)胞,小鼠細(xì)胞 NCL-H460(非小細(xì)胞) 水牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;WB-S47274-88-6D-賴酸鹽酸鹽D-Lysine xy7nochloride
大鼠腎小管上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL舒馬曲坦-d6Sumatriptan-d6質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
RH-35大鼠細(xì)胞 RH-35 rat hepatoma cells DMEM培養(yǎng)基+10%FBS舒馬曲坦-d6琥珀酸鹽Sumatriptan-d6 Succinate質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
IGFBP7 Protein Human 重組人 IGFBP7 / IBP-7 蛋白 (His 標(biāo)簽)雙氯芬酸甲酯Diclofenac Methyl Ester質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
HA(人羊膜細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基ECM雙氯芬酸酰胺Diclofenac Amide質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
食管上皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)芴甲氧羰基-加巴噴丁Fmoc-Gabapentin質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
肝胰腺細(xì)小病毒PCR檢測試劑盒價格腦內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)雌激素酮 3-硫酸鉀鹽Estrone 3-sulfate potassium salt質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
H-4-II-E細(xì)胞,大鼠肝細(xì)胞瘤 人細(xì)胞,Caov-3細(xì)胞 人髓核細(xì)胞裂解物HNPCL雌激素酮 3-甲酯Estrone 3-methyl ether質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
非洲綠猴腎細(xì)胞;VERO E64-甲基傘形酯-N-乙酰-b-D-氨基半乳糖苷(>98%,BR)4-Methylumbelliferyl N-acetyl-β-D-galactosaminide質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
IFNB1 Others Human 人 Ierferon beta / IFN-beta / IFNB 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 對硝基芐醇(>98%,BR)4-Nitrobenzyl alcohol質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
家貓腎細(xì)胞;CATK1無毒型核酸染色劑4S Green Nucleic Acid Stain 4S Green質(zhì)量規(guī)格:BR
人神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLSBES;2-溴乙基磺酸鈉質(zhì)量規(guī)格:>98.5% 2-bromoethanesulphonate
JB6-C41細(xì)胞,小鼠皮膚細(xì)胞 SHG44(細(xì)胞) 犬腎細(xì)胞系/野生型;MDCK/wildBICINE;N,N-二羥乙基甘氨酸質(zhì)量規(guī)格:>99%BICINE
EFNA1 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-A1 / EFNA1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)BES salt; N,N-二(2-羥乙基)-2-氨基乙磺酸鈉質(zhì)量規(guī)格:>99%BES Salt
LS 180(人腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 原代上皮細(xì)胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝:1mlBES free acid; N,N-(2-羥乙基)-2-氨基乙磺酸質(zhì)量規(guī)格:>99%BES free acid
人上皮細(xì)胞HBEpiCBz-2'-脫氧胞苷亞1酰胺單體質(zhì)量規(guī)格:>98%Bz-dC Phosphoramidite
特點(diǎn)優(yōu)勢:
1. 特異性:肝胰腺細(xì)小病毒PCR檢測試劑盒價格使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時,可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。