產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3801 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
松鼠猴病毒PCR檢測試劑盒直銷 | Herpesvirus Saimiri(HVS)PCR | BKP3801 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應(yīng)嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
IL1RN Others Human 人 IL1RA / IL1F3 人細胞裂解液 (陽性對照) 洋橄欖油,英文名或英文縮寫:Olive oil,級別:BR,97%,規(guī)格:5克
非洲綠猴腎細胞;VERO6-鱗醋-葡萄糖醋-三內(nèi)鹽(-20℃) 6-PHOSPHOGLUCONIC cCID TRIwo7ium ScLT 23411-70-4
ITK Others Mouse 小鼠 ITK Kinase (aa 351-619) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) N-乙酰本,英文名或英文縮寫:Acetanilide,級別:CP,規(guī)格:5克
CL-0193RD(人惡性胚胎橫紋肌瘤細胞)5×106cells/瓶×2十二烷shēng huà shì jì容量:1克
MDA-MB-231(ATCC來源), 人癌細胞 人胚腎T細胞,293T細胞 P19(畸胎癌細胞)Poly-L-Lysine 25mg/100mg/1g原裝 Sigma P2636
大鼠卵巢上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL鹽酸甲哌卡因Mepivacaine HCl質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
MOLT-4 人急性母細胞細胞 MOLT-4 human acute lymphoblastic leukemia cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS安普那韋 Amprenavir質(zhì)量規(guī)格:>97%
NOV Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 / 恒河猴 CCN3 / NOV 蛋白 (His 標簽)魯比替康; 9-硝基喜樹堿Rubitecan質(zhì)量規(guī)格:>99%
EB-3(人Butt瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 人脊柱間充質(zhì)干細胞HVMSC泊洛沙姆407Polyethylene-polypropylene glycol質(zhì)量規(guī)格:M.W12000,進口BASF分包
原代單核細胞特制基礎(chǔ)無血清培養(yǎng)基Many types of cells包裝:500/100ml1酸長春質(zhì)堿Catharanthine hemitartrate質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
松鼠猴病毒PCR檢測試劑盒直銷豬腎細胞;PK(15)鹽酸丙哌維林(標準品)Propiverine hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:含量測定
BRL 3A細胞,大鼠肝細胞 人轉(zhuǎn)移細胞,AsPc-1細胞 CM-R109大鼠腦成纖維細胞完全培養(yǎng)基100mL氨標準溶液(1000μg/ml,溶劑:水)Ammonia solution質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml,溶劑:水
大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(低分化);PC-12(低分化)酰嘧磺隆(標準品)Amidosulfuron質(zhì)量規(guī)格:分析標準品
IL20RA Others Human 人 IL20Rα 人細胞裂解液 (陽性對照) 莠滅凈(標準品)Ametryn質(zhì)量規(guī)格:分析標準品,98.8%
人肺微內(nèi)皮細胞cDNAHPMEC cDNA草毒死(標準品) Allidochlor質(zhì)量規(guī)格:分析標準品
SV-HUC-1(人膀胱上皮永生化細胞) 5×106cells/瓶×2 甲型 H3N2 (A/Hong Kong/1/1968) 核蛋白 (Nucleoprotein / NP) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 無機焦嶙酸酶,英文名或英文縮寫:Inorganic Pyrophosphatase,級別:BR,1500u/mg,規(guī)格:10克
人肝竇內(nèi)皮細胞HHSEC1,12-十二二醇 1,12-Dodqccnqdiol 2672-21-4
SERPINA6 Others Human 人 SerpinA6 / CBG 人細胞裂解液 (陽性對照) 鱗醋二輕錳 Mcngcnous dixy7nogqn phosphctq 18718-07-2
HSF 人皮膚成纖維樣細胞嶙酸三間酯,英文名或英文縮寫:Triwo7ium trimetaphosphate,級別:CP,98%,規(guī)格:100克
CM-H131人角膜成纖維細胞完全培養(yǎng)基100mL17199-29-0L-扁桃酸(S)-(+)-Mandelic acid
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:松鼠猴病毒PCR檢測試劑盒直銷使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。