產地 | 進口、國產 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3811 |
用途 | 公司產品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
技術服務內容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
莢膜組織胞漿菌PCR檢測試劑盒供應 | Histoplasma capsulatumPCR | BKP3811 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:莢膜組織胞漿菌PCR檢測試劑盒供應使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析,經過GenBank及自建龐大數據庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現性:該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證,重現性為100%。
3. 靈敏性:該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
REG3D Others Mouse 小鼠 REG3D 人細胞裂解液 (陽性對照) NEXTGEL10%SOLUTIONNext Gel 10%蛋白組學級透明無色液體RTsigma
狗肺成纖維樣細胞;DogL13,4-二 3,4-Dimethoxybenzyl alcohol,96% 1993-3-8 5G 通用試劑
GLIPR1 Others Mouse 小鼠 GLIPR1 / RTVP1 人細胞裂解液 (陽性對照) 糠安;2-呋安;麩安 FurfurylcMinq;2-FurcnMqthylcMinq;2-FurylMqthylcMinq
破骨細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)N-Fmoc-N'-三本甲基-D-半胱酸,英文名或英文縮寫:Fmoc-D-Cys(Trt)-OH,級別:特,98%,規(guī)格:25克
Cyc-tAg細胞,小鼠T細胞瘤(SV40T抗原轉染) 人紫杉醇耐藥株,A2780/Taxol細胞 人肺動脈成纖維細胞裂解物HPAFL高錄酸銨(*)(易)AMMONIUM PERCHLORATE
成骨細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)依諾沙星(水溶性)Enoxacin質量規(guī)格:依諾沙星含量≥60%
HCC-9204細胞,細胞 人細胞,HeLa細胞 人角膜上皮細胞cDNAHCEpiC cDNA氧氟沙星Ofloxacin質量規(guī)格:>98.5%,BR,可用于細胞培養(yǎng)
非洲綠猴腎細胞;BS-C-1氧氟沙星(標準品)Ofloxacin質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品
CSF3R Others Human 人 CD114 / G-CSFR / GCSFR 人細胞裂解液 (陽性對照) 阿巴卡韋 Abacavir質量規(guī)格:>99%,BR
正常大鼠腎細胞;NRK阿巴卡韋 (標準品)Abacavir質量規(guī)格:>98%,標準品
莢膜組織胞漿菌PCR檢測試劑盒供應兔主動脈平滑肌細胞;CCC-SMC-1吡嗪(>98.0%(GC))Pyrazine質量規(guī)格:>98.0%(GC)
小鼠色素瘤細胞;B16-F1 小鼠關節(jié)軟骨細胞完全培養(yǎng)基 100mL2,3-吡嗪二羧酸(>98.0%(HPLC)(T))2,3-Pyrazinedicarboxylic Acid質量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T)
HSC-T6, 大鼠肝星狀細胞系 Rattus茴香偶酰(>98.0%(GC))p-Anisil質量規(guī)格:>98.0%(GC)
ACVR2A Others Human 人 ACVR2 / ACII / ACVR2A 人細胞裂解液 (陽性對照) 苯偶酰(>99.0%(GC))Benzil質量規(guī)格:>99.0%(GC)
人海馬趾神經細胞HN-h苯偶酰 (區(qū)域精制法精制,熔段數:22)Benzil Zone Refined (number of passes:22)質量規(guī)格:
HEL299細胞,紅白細胞細胞 巨核細胞,Dami細胞 人纖維細胞;HT-1080BOC-ON2-(叔-丁氧基碳酰胺)-2-本以100毫克BR,99%
KM小鼠腦神經膠質母細胞瘤瘤株;G422?;悄懰徕c taurocholate hydrate,≥97.0% 145-42-6 1G 通用試劑
CD226 Others Mouse 小鼠 DNAM-1 / CD226 人細胞裂解液 (陽性對照) 馬脲酰組安酰亮安醋(-20℃) HIPPURYL-HIS-LqU 31373-62-6
人上皮細胞HMEpiCβ-葡萄糖苷酸酶100克
FCGR2B Others Rat 大鼠 CD32b / FCGR2B 人細胞裂解液 (陽性對照) PH緩沖液 PH12.0(20℃)NA