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| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號 | BKP3813 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50次 |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：
實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
前病毒PCR檢測試劑盒直銷 | HIV1 Provirus HIV1PCR | BKP3813 |
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。
CSNK2A1 Others Mouse 小鼠 CSNK2A1 / CK2A1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) L-亮醇25克
肺大內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)2-溴-2-基炳醋;2-溴異丁醋;α-溴異丁醋 2-BroMo-2-Mqthylpropionic ccid;α-BroMoisobutyric ccid
小鼠神經(jīng)干細(xì)胞(EGFP標(biāo)記) 人細(xì)胞，NCI-H596[H596]細(xì)胞 NG108-15 [ 108CC15 ](小鼠神經(jīng)細(xì)胞瘤與大鼠神經(jīng)之融合細(xì)胞)透明質(zhì)酸酶1克RT
人細(xì)胞;SMMC-7721亞鈰shēng huà shì jì容量：100克
IL7R Others Mouse 小鼠 IL7Ra / CD127 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 白凡士林Vaseline
白介素-2轉(zhuǎn)染耐VP16絨癌細(xì)胞;JEG-3/VP16-IL-2緊張素IIIAngiotensin III,human 質(zhì)量規(guī)格：>97%,BR
CD27 Others Mouse 小鼠 CD27 / TNFRSF7 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 蜂毒明肽; 蜂針液明肽Apamin 質(zhì)量規(guī)格：BR,>97%
敘利亞倉鼠肌肉細(xì)胞;GH-M1枸櫞酸氯米芬,克羅米芬Clomiphene 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
MAPKAPK5 Others Human 人 MAPKAPK5 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) ML-176;SR-3335SR3335;ML176質(zhì)量規(guī)格：>98%
CL-0081F81(貓腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2Semaxanib(SU-5416 )SU5416 質(zhì)量規(guī)格：>98%,VEGFR(Flk-1/KDR)抑制劑
前病毒PCR檢測試劑盒直銷TNFSF15 Protein Rat 重組大鼠 TNFSF15 / TL1A 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)腺苷5'-O-硫一1酸二鋰鹽Adenosine 5'-O-thiomonophosphate dilithium salt 質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
人卵巢微內(nèi)皮細(xì)胞(HOMEC) ( 5×105 ) Saos-2，人成細(xì)胞 Humanα-酮戊二酸(標(biāo)準(zhǔn)品)2-Ketoglutaric acid質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
人惡性多發(fā)性;ERA-2α-酮戊二酸2-Ketoglutaric acid質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR
ACVR1 Others Human 人 ALK-2 / ACVR1 / ALK2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 卡博替尼 ;XL184Cabozantinib(BMS907351)質(zhì)量規(guī)格：>99%,廣譜酪氨酸激酶抑制劑
CM-H094人滑膜細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mLD-絲氨酸乙酯鹽酸鹽H-D-SER-OET HCL質(zhì)量規(guī)格：>98%
APOA1 Others Human 人 ApoAI 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 3-環(huán)戊基-L-丙氨酸質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR3-Cyclopentane-L-alanine
人胰腺腺泡上皮癌;HPACSEA-0400質(zhì)量規(guī)格：>98%,鈉離子-鈣離子交換子（NCX）抑制劑SEA0400
EPHB4 Others Human 人 EphB4 / HTK (aa 563-987) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 卡格列凈半水；坎格列凈半水質(zhì)量規(guī)格：>98%,高效的選擇性亞型2鈉-葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白(SGLT2) 抑制劑Canagliflozin hemihydrate
RDFs, 大鼠真皮成纖維細(xì)胞dT亞1酰胺單體質(zhì)量規(guī)格：>98%dT Phosphoramidite
rRTEC, 大鼠腎小管上皮細(xì)胞 [CIP 104786]細(xì)胞 293 [HEK-293] (人胚腎細(xì)胞)5--5-脫氧環(huán)1腺苷質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口5'-Iodo-5'-deoxy Adenosine
特點優(yōu)勢：
1. 特異性：前病毒PCR檢測試劑盒直銷使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證，重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性：該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時，可實現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌，可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。
