產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3822 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
人病毒3型PCR檢測試劑盒說明書 | Human Herpesvirus 3 (HHV3)3RTPCR | BKP3822 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:人病毒3型PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
NRG1 Protein Human 重組人 NRG1-alpha 蛋白 (EGF Domain, Fc 標(biāo)簽)酸性嶙酸酶測試盒500支/包
M-NFS-60 (小鼠細胞G-CSF依賴性) 5×106cells/瓶×2 腎系膜細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)哌拉西林 Piperacillin 61477-96-1 5G 通用試劑
人Butt瘤細胞;RAJI過氧化輕30%(*);二氧化輕;二氧化二輕 xy7nogqn Pqroxidq Concqntrctq 77-84-1
DDR2 Others Rat 大鼠 DDR2 Kinase / CD167b 人細胞裂解液 (陽性對照) D-MANNITOLD-甘露醇美國藥典級白色結(jié)晶粉末RTsigma
人胎盤滋養(yǎng)層細胞完全培養(yǎng)基 100mL108-30-5琥珀1;丁二1;琥珀酐;2,5-四氫呋二酮Succinicanhydride ;Succinic acid anhydride;Succinyl oxide;2,5-Diketotetraxy7nofuran;Dixy7no-2,5-furandione;Bernsteinsaure anhydride
ULBP2 Others Human 人 ULBP2 / N2DL-2 人細胞裂解液 (陽性對照) 乙酸銨(分子生物學(xué)級)Ammonium acetate質(zhì)量規(guī)格:>98%,分子生物學(xué)級
KG-1 人髓性紅細胞微晶纖維素(100 um)Cellulose, Microcrystalline質(zhì)量規(guī)格:BR,100 um
HeLa 229人細胞 HeLa 229 human cervical cancer cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS乳糖;α-乳糖,一水alpha-Lactose, monohydrate質(zhì)量規(guī)格:BR
HGF Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 HGF / Hepatocyte Growth Factor 蛋白氯化鈣二水Calcium chloride, dihydrate質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
小鼠周神經(jīng)成纖維細胞(MPNF)(5×105) HL-60, 人早幼粒細胞 Human乙二醇Ethylene glycol質(zhì)量規(guī)格:BR
人病毒3型PCR檢測試劑盒說明書SPN Others Mouse 小鼠 SPN / CD43 人細胞裂解液 (陽性對照) 布地奈德-d8Budesonide-d8質(zhì)量規(guī)格:美國進口
EJ 人細胞6α-羥基布地奈德6α-Hydroxy Budesonide質(zhì)量規(guī)格:美國進口
SW1116人腺癌細胞 SW1116 human colon adenocarcinoma cells L-15培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS6β-羥基布地奈德6β-Hydroxy Budesonide質(zhì)量規(guī)格:美國進口
CD70 Protein Rat 重組大鼠 CD70 / CD27L / TNFSF7 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)亞葉酸鈣水合物Folinic acid calcium salt hydrate質(zhì)量規(guī)格:美國進口
人脂肪細胞-內(nèi)臟(HPA-v)(1×106 ) MDA-MB-231(ATCC來源), 人癌細胞 Human喜樹堿鈉鹽 Camptothecin質(zhì)量規(guī)格:美國進口
人成纖維細胞總RNAHLF NA本亞磺酸鈉5毫克
CD79B Others Rat 大鼠 CD79B / B29 人細胞裂解液 (陽性對照) 2,3-二溴炳醇 2,3-Dibromo-1-propcnol 96-13-9
人椎間盤髓核細胞完全培養(yǎng)基 100mL十二醇25克
VERO C1008 (E6)細胞,非洲綠猴腎細胞 CHO/dhFr-(中國倉鼠二氫葉酸還原酶缺陷細胞) 小鼠T瘤細胞(雞OVA基因修飾);E.G7-OVA抗生素Ⅲ號培養(yǎng)基25克
EFNB2 Protein Canine 重組狗 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 (His 標(biāo)簽)4298-52-62-乙炔2-Ethynylthiopxene