產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3831 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術服務內(nèi)容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
人病毒1型群型PCR檢測試劑盒供應 | Human Immunodeficiency Virus 1(HIV1MA)1MARTPCR | BKP3831 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
C127(小鼠癌細胞) 5×106cells/瓶×2Campy-Cefex瓊脂基礎shēng huà shì jì容量:2~8℃100毫升
CN2 Others Human 人 CN2 / Coactin-2 人細胞裂解液 (陽性對照) 11-基十一烷酸 11-Aminoundecanoic acid,97% 2432-99-7 25G 通用試劑
大鼠骨骼肌成肌細胞;L6半纖維速酶(-20℃) HqMICqLLULcSq 902-26-3
BCAM Others Mouse 小鼠 BCAM 人細胞裂解液 (陽性對照) VANCOMYCINxy7noCHLORIDE鹽酸萬古霉素美國藥典級白色粉末FROZENsigma
BGC-823 人低分化前細胞531-91-9N,N-二本基聯(lián)本胺N,N'-Dipxenylbenzidine
TNFRSF13C Others Rat 大鼠 BAFFR / TNFRSF13C 人細胞裂解液 (陽性對照) 脫氯阿托伐醌Deschloro Atovaquone質量規(guī)格:美國進口
人上皮細胞;MCF-10A鹽酸阿扎司瓊-d3Azasetron-d3, Hydrochloride質量規(guī)格:美國進口
FD6細胞,人細胞與倉鼠肺細胞雜交細胞 小鼠,P19細胞 CM-H103胎兒真皮成纖維細胞完全培養(yǎng)基100mLY-25130 鹽酸Y-25130 Hydrochloride質量規(guī)格:美國進口
P3X63Ag8(小鼠細胞) 5×106cells/瓶×2去甲基尼扎替丁Desmethyl Nizatidine質量規(guī)格:美國進口
Promocell C-27437 Preadipocyte DiffereiationMedium KIT, 前脂肪細胞分化培養(yǎng)基套裝 500ml慶大霉素C1aGentamicin C1a質量規(guī)格:美國進口
人病毒1型群型PCR檢測試劑盒供應CD274 Others Rat 大鼠 PD-L1 / B7-H1 / CD274 人細胞裂解液 (陽性對照) 達沙替尼羧酸Dasatinib Carboxylic Acid質量規(guī)格:美國進口
小鼠樹突狀細胞低轉移細胞(綠色熒光蛋白標記);DG6-GFPN-去甲基加蘭他敏N-Desmethyl Galanthamine質量規(guī)格:美國進口
小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-B5 I型膠原酶(含100mL酶解緩沖液) 10mLO-去甲基加蘭他敏O-Desmethyl Galanthamine質量規(guī)格:美國進口
Saos-2,人成細胞 HumanO-去甲基加蘭他敏β-D-葡萄糖苷酸O-Desmethyl Galanthamine β-D-Glucuronide質量規(guī)格:美國進口
EM2 Others Mouse 小鼠 EM2 人細胞裂解液 (陽性對照) 異吉非羅齊(吉非羅齊雜質)iso-Gemfibrozil (Gemfibrozil Impurity)質量規(guī)格:美國進口
小鼠細胞(B類);Pan02 透明質酸酶(含100mL酶解緩沖液) 10mL4-溴芘(>95.0%(GC))質量規(guī)格:>95.0%(GC)4-Bromopyrene
A549/DDP, 人肺腺癌耐藥細胞株 Human1,6-二氨基芘(>98.0%(HPLC)(N))質量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(N)1,6-Diaminopyrene
PLA2G1B Others Human 人 PLA2G1B / PLA2 人細胞裂解液 (陽性對照) 1,3-二氨基芘質量規(guī)格:1,3-Diaminopyrene
人小膠質細胞RNAHM miRNA5 μg2,7-二叔丁基芘(>98.0%(GC))質量規(guī)格:>98.0%(GC)2,7-Di-tert-butylpyrene
CFD Others Human 人 CFD / Adipsin 人細胞裂解液 (陽性對照) 1-溴甲基萘質量規(guī)格:>99%1-(Bromomethyl)naphthalene
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:人病毒1型群型PCR檢測試劑盒供應使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果。