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【產(chǎn)品名稱】: 人偏肺病毒PCR檢測試劑盒說明書
【英文名稱】: Human Metapneumo Virus(hMPV )RTPCR
【貨號】: BKP3834

【儲存條件及有效期】:
-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融，有效期6個月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運輸】
u 樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；
u 存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h，-70℃以下可長期保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（最多凍融3次）；
u 運輸：采用冰壺或泡沫箱加冰密封進行運輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑，如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒，也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。

組成及試劑配制:

酶標板：一塊（96孔）
2、 標準品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

人偏肺病毒PCR檢測試劑盒說明書其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位)；在細菌學(xué)中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板?？芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。

rRTEC, 大鼠腎小管上皮細胞錄化亞銻，英文名或英文縮寫：Antimony(III)chloride，級別：CP，規(guī)格：10克

ENPP2 Others Human 人 Autotaxin / ENPP2 / NPP2 人細胞裂解液 (陽性對照) 氧化鎢銨 Ammonium metatungstate hydrate,≥99.0% 174501-64-5 25G 通用試劑

大鼠嗅鞘細胞完全培養(yǎng)基 100mL1醋 ≥99%(2-8℃) LIGNOCqRIC cCID 227-29-2

DH82狗腎惡性癥細胞 DH82 dog kidney maligna histiocytosis cells MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS曙紅Y(水溶)shēng huà shì jì容量：100克

IFNA5 Protein Human 重組人 IFNA5 / IFNaG / Ierferon alpha-G 蛋白 (Fc 標簽)9025-35-8α-半乳糖苷酶(+4℃)EC 3.2.1.22
TE671 subline No.2細胞，人橫紋肌細胞 化膿性鏈球菌 轉(zhuǎn)PYTL基因小鼠支持細胞;15P-1妥布霉素ATobramycin A質(zhì)量規(guī)格：美國進口

CCL4 Protein Human 重組人 CCL4 / MIP1B 蛋白 (His 標簽)生物素基妥布霉素酰胺Biotinyl Tobramycin Amide質(zhì)量規(guī)格：美國進口

LS-174T(人腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 人 PRNP / Prion 人細胞裂解液 (陽性對照) 妥布霉素硫酸鹽Tobramycin sulphate質(zhì)量規(guī)格：美國進口

兔主動脈平滑肌細胞;CCC-SMC-1氘化妥布霉素Tobramycin Deuterated質(zhì)量規(guī)格：美國進口

CHL1 Others Mouse 小鼠 CHL-1 人細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸拓撲替康標記 d6Topotecan Hydrochloride Labeled d6質(zhì)量規(guī)格：美國進口
P3X63Ag8.653細胞，細胞 耐長春新堿細胞系,HCT-8/VCR細胞 CM-H028人內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基100mLN-Boc-N-去甲伊馬替尼N-Boc-N-Desmethyl Imatinib質(zhì)量規(guī)格：美國進口

正常大鼠腎細胞;NRK伊立替康標記物d10Irinotecan Labeled d10質(zhì)量規(guī)格：美國進口

REG3A Others Mouse 小鼠 REG3A 人細胞裂解液 (陽性對照) 6-O-甲基-d3-鳥嘌呤6-O-Methyl-d3-guanine質(zhì)量規(guī)格：美國進口

口腔角質(zhì)細胞培養(yǎng)基OKMN7-(2-氨基甲酰-2-羥乙基)鳥嘌呤N7-(2-Carbamoyl-2-hydroxyethyl)guanine質(zhì)量規(guī)格：美國進口

MAPK13 Others Human 人 p38 delta / MAPK13 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 2-氨基-6,8-二羥基嘌呤鹽酸鹽2-Amino-6,8-dihydroxypurine Hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：美國進口
人偏肺病毒PCR檢測試劑盒說明書人侵襲性脈絡(luò)膜色素瘤細胞;MuM-2B血清兔抗BSA10克RT

HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/Viet Nam/1203/2004) 血凝素HA2 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) 酰輔酶A 內(nèi)鹽 ≥93% (HPLC) (-20℃) ccqtyl coqnzymq c wo7ium sclt 1009-73-

MDA-MB-436 人腺癌細胞葡聚糖凝膠 Sephade... Sephadex G-50 Fine 9048-71-9 100G 分離試劑

NCI-H358人非小細胞細胞 NCI-H358 cells in human non small cell lung cancer RPMI-1640(GIBCO)+10%FBSwo7iumGluconate葡萄糖酸鈉*白色至微黃色精細結(jié)晶RTsigma

KITLG Protein Human 重組人 SCF / C-kit ligand 蛋白 (aa 1-189, His 標簽)(甘油)
PCR檢測試劑盒

人偏肺病毒PCR檢測試劑盒說明書 (一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中，按100g:3ml的比例加入Trizol試劑，嚴格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg組織，寧多勿少）置于玻璃勻漿器中勻漿后，冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中，4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol，振蕩15s，室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細吸取上層水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol，振搖，置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min，EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清，紙巾吸干，加入75%乙醇1ml，振搖，充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇，空氣干燥10min（可離心加快干燥，盡量吸盡離心液體）。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混勻），-20oC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度，所有標本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳，顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。