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PCR實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μ進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達量。

特點優(yōu)勢：
1. 特異性：33人副病毒3型PCR檢測試劑盒價格使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
 2.   重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證，重現(xiàn)性為100%。
3.   靈敏性：該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌，可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優(yōu)勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

原代成纖維細胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基Many types of cells包裝：500/250/100ml透析袋4000shēng huà shì jì容量：200u

HT-1080細胞，人纖維 人管癌細胞,T47D細胞 小膠質(zhì)細胞生長添加物MGSα-半乳糖苷酶 α-Galactosidase from green coffee beans 9025-35-8 5UN 通用試劑

大額牛與婆羅門牛雜交F1代皮膚成纖維樣細胞;BOS-6流醋卡那每速 KcncMycin Sulfctq;Ccntrqx;CristcloMicinc;qntqro kcnccin;KcMycin;KcMynqx;Kcncbristol;KcncnMytrqx 2389-94-0

IL25 Others Mouse 小鼠 IL25 人細胞裂解液 (陽性對照) 谷草轉(zhuǎn)酶測試盒shēng huà shì jì容量：10個

白牦牛皮膚細胞;Yak-2122-78-1本乙醛pxenylacetaldehyde
SLAMF6 Others Mouse 小鼠 SLAMF6 / Ly108 人細胞裂解液 (陽性對照) 十一酸甲酯(Standard for GCS,≥99.0%(GC))Methyl undecanoate質(zhì)量規(guī)格：Standard for GCS,≥99.0%(GC)

小鼠系;LA795正壬烷(standard for GC,≥99.5%(GC))Nonane質(zhì)量規(guī)格：standard for GC,≥99.5%(GC)

CRELD1 Others Human 人 CRELD1 人細胞裂解液 (陽性對照) 正壬醇(Standard for GC,≥99.5%(GC))1-Nonanol質(zhì)量規(guī)格：Standard for GC,≥99.5%(GC)

SH-SY5Y人神經(jīng)母細胞瘤細胞 SH-SY5Y human neuroblastoma cells MEM/F-12(1:1)+10%FBS壬酸(Standard for GC ,>99%(GC)) Nonoic acid質(zhì)量規(guī)格：Standard for GC ,>99%(GC)

SF17細胞，人細胞 洋蔥假單胞菌 人角膜細胞總RNAHK NA正辛醇(Standard for GC,>99.5%)n-Octanol質(zhì)量規(guī)格：Standard for GC,>99.5%
33人副病毒3型PCR檢測試劑盒價格PCSK9 Others Rhesus 恒河猴 PCSK9 / NARC1 人細胞裂解液 (陽性對照) 2'-脫氧尿苷-5'-三1酸三鈉鹽dUTP質(zhì)量規(guī)格：>98%，分子生物學級

盤羊皮膚細胞;ASHS2DL-組氨酸DL-Histidine質(zhì)量規(guī)格：0.98

VEGFC Others Rat 大鼠 VEGFC / VEGF-C (aa 108-223) 人細胞裂解液 (陽性對照) DL-組氨酸鹽酸鹽DL-Histidine·HCl質(zhì)量規(guī)格：>98%,一水物，BR

人成纖維細胞完全培養(yǎng)基 100mLDL-高苯丙氨酸DL-Homophenylalanine質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

Y79細胞，人視網(wǎng)膜母細胞瘤 球毛殼霉 小鼠系;LA795DL-高絲氨酸DL-Homoserine質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細胞;KMYF棓原，英文名或英文縮寫：Ellagic acid，級別：AR，70%，規(guī)格：500克

大鼠肝細胞瘤;H-4-II-E 紅白細胞細胞，HEL299細胞 PT67細胞，鼠逆轉(zhuǎn)錄酶病毒包裝細胞聚1醇鱗醋銨 cmmonium clcohol polyvinyl phosphctq

JEC, 人子宮內(nèi)膜腺癌細胞系 Human二錄醋 Dichloroccqtic ccid

LRP1 Others Human 人 LRP1 / A2MR / CD91 (aa 786-1165) 人細胞裂解液 (陽性對照) 二甲基馬來1，英文名或英文縮寫：2,3-Dimetxylmaleic anhydride，級別：AR，99%，規(guī)格：10克

前脂肪細胞分化培養(yǎng)基PADMGalactopyranoside)
反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個堿基，應(yīng)嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。