產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3860 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
人類嗜淋巴細胞病毒1型PCR檢測試劑盒價格 | Human Tcell Lymphoma Virus 1(HTLV1)T1RTPCR | BKP3860 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:人類嗜淋巴細胞病毒1型PCR檢測試劑盒價格使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
A-431(人表皮癌細胞) 5×106cells/瓶×2十二烷基本磺酸鈉-6,英文名或英文縮寫:wo7ium dodecylbenzenesulfonate,級別:FMP,規(guī)格:1克
RK2 Others Human 人 RK2 / k-B / KB 人細胞裂解液 (陽性對照) 1-脫氧-D-葡萄糖-5-鱗醋酯內(nèi)鹽 ≥99.0% (TLC)(-20°C) (2,3-dixy7noxy-4-oxo-pqntoxy)phosphonic ccid 190079-18-6
恒河猴胚腎細胞;FRhK-4 [FRhK4]紅色氧化;四氧化三;丹;紅丹;氧化 Lqcd(II,IV)oxidq;MiniuM 1314-41-6
AFM Others Human 人 AFM / Afamin 人細胞裂解液 (陽性對照) AEBSFAEBSF蛋白組學(xué)級50MG30827-99-7COLD
小腸平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)6284-40-8葡MegluMine (AS)
RTN4R Others Human 人 Nogo Receptor / NOGOR / RTN4R 人細胞裂解液 (陽性對照) 乙酰輔酶A三鋰鹽Acetyl coenzyme A trilithium salt質(zhì)量規(guī)格:95%,美國進口原裝
人胰腺上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL尿素酶,脲酶(巨豆)Urease質(zhì)量規(guī)格:>45 U/mg,進分
HT1080細胞,人成纖維細胞 熱帶念珠菌 tTA基因修飾的小鼠(B類);F9-CAG-tTA-1A3蛋白酶VIIIProtease type VIII質(zhì)量規(guī)格:美國原裝進口7-15 units/mg,來源于地衣芽孢桿菌
CCL3 Protein Rat 重組大鼠 CCL3 / Mip1a 蛋白曲安奈德Triamcinolone Acetonide質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
MDBK(牛腎細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 EphB2 / Hek5 人細胞裂解液 (陽性對照) 曲安奈德(標(biāo)準(zhǔn)品)Triamcinolone Acetonide質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
人類嗜淋巴細胞病毒1型PCR檢測試劑盒價格PRL Others Mouse 小鼠 PRL / Prolactin 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 草酸依地普侖/草酸艾司西酞普蘭(標(biāo)準(zhǔn)品)Escitalopram Oxalate質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
大鼠嗜堿性粒細胞性細胞;RBL-1消旋卡多曲Racecadotril質(zhì)量規(guī)格:>99.5%,EP6.2
BEL-7402細胞,細胞 人口腔表皮樣癌細胞,KB細胞 小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細胞;PUMC-mips-A2消旋卡多曲(標(biāo)準(zhǔn)品)Racecadotril質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
C57BL/6小鼠T細胞瘤細胞;RMA乙酰螺旋霉素Acetylspiramycin質(zhì)量規(guī)格:>1200u/mg,CP2005
CD226 Others Human 人 CD226 / DNAM-1 人細胞裂解液 (陽性對照) 尼羅替尼Nilotinib質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR
成纖維細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)熒光素酶(細菌),英文名或英文縮寫:Luciferase from Bacteria,級別:精制級,40u/mg,規(guī)格:5克
T/G細胞,人平滑肌細胞 KM小鼠網(wǎng)織細胞瘤株,LⅡ細胞 人真皮成纖維細胞-胎兒裂解物HDF-f L三鈉鹽三(3-磺酰苯... TPPTS,≥95.0% 63995-70-0 250MG 通用試劑
NEC(人細胞) 5×106cells/瓶×2拂橡膠 III Fluoro gum III
Caki-1(人腎透明細胞癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0046C4-2(人細胞)5×106cells/瓶×2 小鼠單核巨噬細胞;J774A.1ALKPHOS2COMPONENTSYSTEMS堿性嶙酸酶(含酶及稀釋液)生物技術(shù)級1000 UnitsCOLD
綿羊皮膚細胞;OAR-S1硅烷偶聯(lián)劑SILANE COUPLING AGENT
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。