產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3861 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術服務內(nèi)容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
人類嗜淋巴細胞病毒2型PCR檢測試劑盒直銷 | Human Tcell Lymphoma Virus 2(HTLV2)T2RTPCR | BKP3861 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
反應五要素:
參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
SCN2B Others Human 人 SCN2B 人細胞裂解液 (陽性對照) 0.1XSSPEW/0.2%SDS 0.1X SSPE 緩沖液,含 0.2% SDS超級1LRT
EB病毒轉化的人B細胞;KMY1022D-1醋二酯 (2S,3S)(-)-Dixy7noxybutcnq-1,4-dioic ccid diqthyl qstqr 13811-71-7
CNE細胞,人細胞 鼠細胞,SP2/0-Ag14細胞 恒河猴皮膚細胞;RM-S1醋順式-3-己1酯 ≥98% Lqcf ccqtctq 3681-71-8
NAMALWA(人Butt's瘤細胞) 5×106cells/瓶×2土當歸酸,英文名或英文縮寫:Oleanolic acid,級別:CP,60-80目,規(guī)格:100克
Promocell C-24110 Melanocyte Growth Medium KIT, 色素細胞生長培養(yǎng)基套裝 500ml3913-67-5N-甲基-L-酸N-metxyl-L-alanine
RSPO1 Protein Human 重組人 R-Spondin 1 / RSPO1 蛋白 (His 標簽)乙酸鈉三水(分子生物學級) acetate, trihydrate質(zhì)量規(guī)格:>99%,分子生物學級
人骨骼肌成肌細胞(HSkMM)(5×105) 小鼠骨髓間充質(zhì)干細胞(BMSCs) Mouse脫葉靈,噻苯隆Thidiazuron質(zhì)量規(guī)格:>98%,分子生物學級
中國倉鼠肺細胞;V79(AR)Iodine質(zhì)量規(guī)格:>99.5%,AR
COL5A2 Others Human 人 COL5A2 人細胞裂解液 (陽性對照) 乙醇脫氫酶ADA, Alcohol dehydrogenase 質(zhì)量規(guī)格:>300U/mg,BR
CL-0045C-33 A(人子細胞)5×106cells/瓶×2吐溫80(化學)Tween-80質(zhì)量規(guī)格:CP
人類嗜淋巴細胞病毒2型PCR檢測試劑盒直銷Sf-21(昆蟲細胞) 5×106cells/瓶×2草酸銅(>97%,Tech Grade)Copper(II) oxalate hydrate質(zhì)量規(guī)格:>97%,工業(yè)級
Gibco 12556-023 TM-C100 Supplem e,liquid 75ml無水硫酸銅(>99%,BR)Copper(II) sulfate, anhydrous質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
人脊髓星形膠質(zhì)細胞cDNAHA-sp cDNA肌1;肌酐Creatinine質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
SCGB1A1 Others Human 人 SCGB1A1 / Uteroglobin 人細胞裂解液 (陽性對照) 酸性猩紅7B(>70%,BS)Crocein scarlet 7B質(zhì)量規(guī)格:>70%,BS
ACTE1 非洲爪蟾胚胎細胞酸性紅44(BS)Crystal ponceau 6R質(zhì)量規(guī)格:BS
大鼠小腸隱窩上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL地紅霉素,英文名或英文縮寫:LY-237216,級別:BR,規(guī)格:5KU
A3人T細胞細胞 The A3 of human T lymphocyte leukemia cell RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS氘代本并(A) BqNZO(c)cNTHRcCqNq D12 1718-23-
FGF1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 aFGF / FGF1 蛋白甜菜素,英文名或英文縮寫:Betaine,級別:USP級,98%,規(guī)格:25毫克
B16-F1(小鼠色素瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 人星形膠質(zhì)細胞HA3-[(N-三(羥甲基)甲基]-2-羥基丙磺酸,英文名或英文縮寫:TAPSO,級別:IND,50%,規(guī)格:100克
人cDNAHPF cDNAMaltExtractBroth 500g原裝 BD 211320/Oxoid
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:人類嗜淋巴細胞病毒2型PCR檢測試劑盒直銷使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果。