產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3852 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
技術服務內容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
人多瘤病毒7PCR檢測試劑盒價格 | Human Polyomavirus 7 7 PCR | BKP3852 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:人多瘤病毒7PCR檢測試劑盒價格使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
CN5 Others Human 人 CN5 / Coactin-5 人細胞裂解液 (陽性對照) L-ASPARTICACIDL-天門冬酸*白色粉末RTsigma
大耳山羊皮膚細胞;LDG-31-錄代二十碳烷 1-CHLOROqICOScNq 417-0-7
IL5RA Others Mouse 小鼠 IL5Ra / CD125 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) BROMOpxenOLBLUEwo7iumSALT溴酚藍,鈉鹽ACS級淺紅色至紫色粉末RTsigma
前脂肪細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)199培養(yǎng)基1盒
興國鯉尾鰭細胞;XGL 人細胞,SW480[SW-480]細胞 Tca-8113(舌鱗癌細胞)Urea 250g/500g/1kg/5kg原裝 Amresco 0378
SK-N-SH, 人神經(jīng)母細胞瘤細胞硝酸鈀Palladium (II) nitrate dihydrate質量規(guī)格:BR
人惡性色素瘤細胞;A-375 [A375] 大鼠膀胱平滑肌細胞完全培養(yǎng)基 100mL鈀粉(>99%,BR)Palladium, powder質量規(guī)格:>99%,BR
M1 小鼠細胞乙酸副品紅(>85%,BS)Pararosaniline acetate質量規(guī)格:>85%,BS
KIT Others Human 人 c-KIT / CD117 人細胞裂解液 (陽性對照) 鈣激活鉀通道阻斷劑來源于覃青霉Paxilline*, from Penicillium paxilli質量規(guī)格:>98%,BC
小鼠前細胞;MFC青霉酸(>98% (HPLC),BC)Penicillic acid質量規(guī)格:>98% (HPLC),BC
人多瘤病毒7PCR檢測試劑盒價格MA, 小鼠星形膠質細胞L-谷氨酸二乙酯鹽酸鹽L-Glutamic acid diethyl ester hydrochloride質量規(guī)格:0.97
RDFs, 大鼠真皮成纖維細胞 ICPB 7[C-1;ICMP 8639;NCPPB 2626]細胞 CGM1(EB病毒轉化的B細胞)L-絲氨酸(標準品)L-Serine質量規(guī)格:>99%,標準品
人口腔表皮樣癌細胞;KBL-精氨酸(標準品)L-Arginine質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
SERPINF1 Others Human 人 SerpinF1 / SERPINF1 / PEDF 人細胞裂解液 (陽性對照) L-精氨酸L-Arginine質量規(guī)格:≥98%,BR
人APP基因轉染CHO細胞株;7WD10L-精氨酸鹽酸鹽L-Arginine hydrochloride質量規(guī)格:>99%,BR
MADB106(大鼠癌細胞) 5×106cells/瓶×24,5-乙撐二硫代-1,3-二硫酚-2-酮(>98.0%(GC))質量規(guī)格:>98.0%(GC)4,5-Ethylenedithio-1,3-dithiol-2-one
Promocell C-22110 Endothelial Cell GrowthMedium KIT, 內皮細胞生長培養(yǎng)基套裝 500ml4,5-甲二硫基-1,3-二硫醇-2-酮(>95.0%(HPLC))質量規(guī)格:>95.0%(HPLC)4,5-Methylenedithio-1,3-dithiol-2-one
人牙齦成纖維細胞HGF3,3'-Bithienyl(>98.0%(GC))質量規(guī)格:>98.0%(GC)3,3'-Bithiophene
CL Others Human 人 CL-1 / CL / Chymoypsin-like protease 人細胞裂解液 (陽性對照) 2,1,3-苯并噻二唑(>99.0%(GC))質量規(guī)格:>99.0%(GC)2,1,3-Benzothiadiazole
盤羊皮膚細胞;ASHS34,5-去亞異丙基托吡酯質量規(guī)格:美國進口4,5-Desisopropylidene Topiramate