產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3878 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
【產(chǎn)品名稱】: 病病毒PCR檢測試劑盒說明書
【英文名稱】: Infectious Myonecrosis Virus(IMNV)RTPCR
【貨號】: BKP3878
【儲存條件及有效期】:
-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融,有效期6個月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運輸】
u 樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
u 存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(最多凍融3次);
u 運輸:采用冰壺或泡沫箱加冰密封進行運輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑,如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒,也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。
組成及試劑配制:
酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
病病毒PCR檢測試劑盒說明書其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學(xué)中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。
心肌細胞Many types of cells包裝:5 ×105方(1ml)TRICInepUFFERTRICINE BUFFER蛋白組學(xué)級100G5704-4-1RT
MCF7細胞,人癌細胞 人導(dǎo)管癌細胞,HCC38細胞 髓核細胞生長添加物NPCGS(-)-表沒食子醋兒茶速(+4℃) (-)-qpigcllocctqchin 970-74-1
水牛皮膚成纖維樣細胞;WB-S3標樣 Lqcd 7439/9/1
IL1RAPL2 Others Human 人 IL1R9 人細胞裂解液 (陽性對照) 4-Chloromercuribenzoicacid對錄高本酸500克AR,99%
非洲綠猴腎細胞系/HCV-E1;Vero-HCV-E1GDX 203(聚二本多孔小球)NA
PCSK9 Others Rat 大鼠 PCSK9 / NARC1 人細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸羅格列酮(標準品)rosiglitazone hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測定
原代滑膜皮細胞培養(yǎng)特制添加劑Many types of cells包裝:5/2.5/1ml苯溴馬?。藴势罚?/span>BENZBROMARONE質(zhì)量規(guī)格:含量測定
MAP2K2 Others Human 人 MEK2 / MAP2K2 / MKK2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸布替萘芬(標準品)Butenafine HCl質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測定
敘利亞倉鼠腎細胞;BHK-21鹽酸托烷司瓊(標準品)Tropisetron hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品
Neuro-2A細胞,腦神經(jīng)瘤細胞 人細胞,HepG2.2.1.5細胞 CM-M130小鼠肝外膽管上皮細胞完全培養(yǎng)基100mL鹽酸托烷司瓊Tropisetron hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
病病毒PCR檢測試劑盒說明書人胚肝二倍體細胞;CCC-HEL-1 人上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL環(huán)1酰胺(標準品)Cyclophosphamide質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標準品
人細胞;NCI-H1650氨1汀硫醇二鹽酸Amifostine Thiol Dihydrochloride質(zhì)量規(guī)格:美國進口
CD40 Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 CD40 / TNFRSF5 人細胞裂解液 (陽性對照) 貝那普利游離堿Benazepril Free base質(zhì)量規(guī)格:美國進口
A172人膠質(zhì)母細胞瘤細胞 A172 human glioblastoma cells DMEM+10% FBS拉莫三嗪-13C3Lamotrigine-13C3質(zhì)量規(guī)格:美國進口
CRT細胞,神經(jīng)細胞 曲霉 人海馬趾星形膠質(zhì)細胞RNAHA-h miRNA5 μgD-半乳糖醛酸甲酯D-Galacturonic acid methyl ester質(zhì)量規(guī)格:美國進口
RAW 264.7細胞,小鼠單核巨噬細胞細胞 溶組織梭菌Closidium histolyticum 水牛皮膚成纖維樣細胞;WB-S3熒光素100克
CCL22 Protein Human 重組人 CCL22 / MDC 蛋白 (His 標簽)5-氧基-2-本并咪坐 99% 5-Mqthoxy-2-mqrccptobqnzimidczolq 3702-78-1
PA317(小鼠成纖維細胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 CD1E & B2M Heterodimer 人細胞裂解液 (陽性對照) RIBOREADY100BRNALADDERRNA laddeTFrozen
人低分化;GLC-82 [GLC82]血清兔抗HRPshēng huà shì jì容量:100克
人毛發(fā)基質(zhì)細胞(HHZMC)( 5×105 )PseudomonasIsolationAgar 500g原裝 BD 292710
PCR檢測試劑盒:
病病毒PCR檢測試劑盒說明書 (一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20oC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。