產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3915 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
【產(chǎn)品名稱】: 金氏金氏菌PCR檢測試劑盒供應(yīng)
【英文名稱】: Kingella kingaePCR
【貨號】: BKP3915
【儲存條件及有效期】:
-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融,有效期6個月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運輸】
u 樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
u 存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(最多凍融3次);
u 運輸:采用冰壺或泡沫箱加冰密封進行運輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑,如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒,也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。
組成及試劑配制:
酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
金氏金氏菌PCR檢測試劑盒供應(yīng)其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學(xué)中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。
MADB106(大鼠癌細胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 CD2 人細胞裂解液 (陽性對照) 葡聚糖凝膠LH-60shēng huà shì jì容量:250毫克
豹貓肺成纖維樣細胞;LCL12,5-二氧基本同 2',5'-Dimqthoxyccqtophqnonq 101-38-3
CNPY2 Others Human 人 CNPY2 人細胞裂解液 (陽性對照) 豬膽鹽shēng huà shì jì容量:RT100克
腦平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)錄鉑酸25克RT
BJAB細胞,人B細胞瘤細胞系 KM小鼠未分化神經(jīng)瘤株,B22細胞 人成纖維細胞裂解物HPrFLpxenyletxyl Alcohol
LTPEP-a-2 人三環(huán)唑標準溶液(10μg/ml,u=2%)Tricyclazol solution質(zhì)量規(guī)格:10μg/ml,u=2%
MDA-MB-453人癌細胞 Human breast cancer cell line MDA-MB-453 L-15+10%FBS氟樂靈標準溶液(100μg/ml,u=3%)Trifluralin solution質(zhì)量規(guī)格:100μg/ml,u=3%
RETN Protein Mouse 重組小鼠 Resistin / ADSF / RETN 蛋白 (Fc 標簽)草達津(標準品)Trietazine質(zhì)量規(guī)格:分析標準品
人胚;CCC-HPF-1 SK-N-SH, 人神經(jīng)母細胞瘤細胞 Human阿克泰(分析標準品,98%)Thiamethoxam質(zhì)量規(guī)格:分析標準品,98%
小鼠腹脊髓神經(jīng)元MN-vsc三唑酮(分析標準品,99.8%)Triadimefon質(zhì)量規(guī)格:分析標準品,99.8%
大鼠胎兒真皮成纖維細胞完全培養(yǎng)基 100mL溴化鈉 bromide質(zhì)量規(guī)格:>99%,AR
Vero非洲綠猴腎細胞 Vero the African green monkey kidney cells MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBSD-α-氨基己二酸D-a-Aminoadipic acid質(zhì)量規(guī)格:0.97
IFNW1 Protein Human 重組人 IFN omega 1 / IFNW1 蛋白 (His 標簽)D-高苯丙氨酸D-Homophenylalanine質(zhì)量規(guī)格:>90%(T),BR
L W-3A(小鼠皮下結(jié)締組織細胞) 5×106cells/瓶×2 HeLa [ Chang Liver ](張氏肝細胞)D-焦谷氨酸D-Pyroglutamic acid質(zhì)量規(guī)格:0.98
膀胱平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)D-環(huán)丙基丙氨酸D-Cyclopropylalanine質(zhì)量規(guī)格:BR
金氏金氏菌PCR檢測試劑盒供應(yīng)胃粘膜上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)促腎上腺皮質(zhì)激素(1-13),人質(zhì)量規(guī)格:>95%,BRACTH (1-13), human
F7 Others Human 人 F7 / Coagulation Factor VII 人細胞裂解液 (陽性對照) 促腎上腺皮質(zhì)激素(1-16),人質(zhì)量規(guī)格:>95%,BRACTH (1-16), human
NIH3T3 小鼠胚胎成纖維細胞促腎上腺皮質(zhì)激素(1-17),人質(zhì)量規(guī)格:>95%,BRACTH (1-17), human
猴脈絡(luò)膜-視網(wǎng)膜(內(nèi)皮)細胞;RF/6A促腎上腺皮質(zhì)激素(1-24), 人質(zhì)量規(guī)格:>95%,BRACTH (1-24), human
HNE2, 人細胞系垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽-27,人,小鼠,綿羊,豬,大鼠質(zhì)量規(guī)格:>95%,BRPACAP-27 (human, mouse,ovine, porcine, rat)
PCR檢測試劑盒
金氏金氏菌PCR檢測試劑盒供應(yīng) (一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20oC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。