產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3918 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
產(chǎn)酸克雷伯菌PCR檢測試劑盒說明書【儲存條件及有效期】:
-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融,有效期6個月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運(yùn)輸】
u 樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
u 存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(最多凍融3次);
u 運(yùn)輸:采用冰壺或泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑,如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒,也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。
【產(chǎn)品名稱】: 產(chǎn)酸克雷伯菌PCR檢測試劑盒說明書
【英文名稱】: Klebsiella oxytocaPCR
【貨號】: BKP3918
組成及試劑配制:
酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
產(chǎn)酸克雷伯菌PCR檢測試劑盒說明書其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞中檢出一個靶細(xì)胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
大鼠胰島β細(xì)胞瘤細(xì)胞;RIN-m5F酸性橙II,英文名或英文縮寫:Orange Ⅱ,級別:BR,99%,規(guī)格:25毫克
TEK Others Rat 大鼠 Tie2 / TEK 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (R)-4-芐基-2-惡坐烷同 (R)-4-Bqnzyl-2-oxczolidinonq 1009-44-7
BGC-803 人細(xì)胞L-蘇糖醋鈣 L-Thrqonic ccid cclcium sclt 70723-61-6
97H-CMV-EGFP-puro(慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)人細(xì)胞 97H-CMV-EGFP-puro (leiviral consuct stable sain) of human hepatocellular carcinoma cells DMEM+10% FBS+1%P/S+2ug/ml puromycinMALTEXTRACT麥牙提取物細(xì)菌學(xué)級1KGCOLD
TGFB1 Protein Human 重組人 / 恒河猴 / 狗 TGF-beta 1 / TGFB1 蛋白17469-89-5N,N-二甲基-L-本酸 99%N,N-DImetxYL-L-pxenYLALANINE
LNCaP clone FGC人細(xì)胞 LNCaP clone human prostate cancer cell FGC RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS煙酰胺/尼克酰胺/維生素B3Nicotinamide質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
CTF1 Protein Human 重組人 Cardioophin-1 / CTF1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)維生素B3(標(biāo)準(zhǔn)品)Nicotinamide質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥99%,標(biāo)準(zhǔn)品
小鼠顆粒神經(jīng)元(MGC)(1×106) 6-10B, 人細(xì)胞系 Human醋酸環(huán)丙孕酮,醋酸環(huán)丙氯地孕酮Cyproterone acetate質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
敘利亞倉鼠腎細(xì)胞;BHK-21醋酸環(huán)丙孕酮(標(biāo)準(zhǔn)品)Cyproterone acetate質(zhì)量規(guī)格:含量測定
EPHB6 Others Cynomolgus 食蟹猴 EphB6 / EphB6 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 甲地孕酮Megestrol base質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR
人口腔表皮樣癌細(xì)胞;KB 大鼠尿道上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL鬼臼(85%)Podophyllotoxin質(zhì)量規(guī)格:>85%,BR
PC-12(低分化) 大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(低分化)β-淀粉樣蛋白(25-35)β-Amyloid (25-35)質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
DLL1 Others Mouse 小鼠 DLL1 / Delta-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) β-促激素,人β-MSH, human質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
人惡性非霍奇金瘤患者的自然殺傷細(xì)胞;NK-92MI [NK92MI]β-促激素,猴β-MSH, monkey質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
PDIA4 Others Human 人 ERP72 / PDIA4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) Ac-垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽-38,人,小鼠,綿羊,豬,大鼠Ac-PACAP-38 (human, mouse,ovine, porcine, rat)質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
產(chǎn)酸克雷伯菌PCR檢測試劑盒說明書tTA基因修飾的小鼠(B類);F9-CAG-tTA-4D6 膠原酶(含10mL酶解緩沖液) 1mLTRIS-ACETATE-SDSBUFFER,10XTris-醋酸-SDS電泳緩沖液超級無色無混濁液體RTsigma
HuH-7人細(xì)胞 Human溴水 BroMinq wctqr 776-92-6
CLU Others Mouse 小鼠 CLU / Clusterin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 橙 Acridine Orange base, 75% 494-38-2 1G 染色劑
人腎近曲小管上皮細(xì)胞RNAHRPTEpiC miRNA5 μg尿苷二嶙酸-α-葡糖醛酸,英文名或英文縮寫:UDPGA,級別:BR,規(guī)格:200u
LTF Others Human 人 LTF / Lactoferrin / Lactoansferrin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (L-賴酸)
PCR檢測試劑盒
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20oC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。