產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3922 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
七星庫道蟲PCR檢測試劑盒說明書 | Kudoa septempunctataPCR | BKP3922 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
非洲綠猴腎細(xì)胞;BS-C-1錫粒25克
RK2 Others Rat 大鼠 kB / RK2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) L-賴酸醋酸 L-Lysine acetate salt (HPLC,≥98%) 57282-49-2 5G 通用試劑
人氣管上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL厄貝沙坦 Irbqscrtcn 13840-11-6
UM細(xì)胞,人葡萄膜色素細(xì)胞 土曲霉 人細(xì)胞;MKN-45三本基氧化膦1克RT
ANGPTL4 Protein Human 重組人 ANGPTL4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)100587-90-4醋酸鑭LANTHANUM ACETATE HYDRATE
Lec1倉鼠卵巢細(xì)胞 Lec1 Chinese hamster ovary cells MEMα培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS鹽酸丙卡巴肼/鹽酸甲基芐肼Procarbazine HCl質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,USP,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
IGFBP5 Protein Canine 重組狗 IGFBP5 / IGFBP-5 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)鹽酸丙卡巴肼(標(biāo)準(zhǔn)品)Procarbazine HCl質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
EB (NBL-4) (牛胚氣管細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠垂體細(xì)胞RPC鹽酸丙卡特羅Procaterol HCl質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,CP2005,半水合物
胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)丙泊酚Propofol質(zhì)量規(guī)格:>98.0%,熔點18
FCGR3A Others Rat 大鼠 CD16a / FCGR3A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸雷洛昔芬Raloxifene HCl質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR
七星庫道蟲PCR檢測試劑盒說明書PA317細(xì)胞,小鼠胚成纖維包裝細(xì)胞 6T-CEM(T細(xì)胞) 大鼠腎小球系膜細(xì)胞;HBZY-12-羥基阿托伐他汀內(nèi)酯-d52-Hydroxy Atorvastatin Lactone-d5質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
EFNB1 Protein Rat 重組大鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白 (His 標(biāo)簽)阿替洛爾(標(biāo)準(zhǔn)品)Atenolol質(zhì)量規(guī)格:含量測定,HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品
A-427(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠T細(xì)胞;Cl.Ly1+2-/9阿托伐他汀鈣Atorvastatin calcium質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
人肺動脈內(nèi)皮細(xì)胞總RNAHPAEC NA阿托伐他汀鈣(標(biāo)準(zhǔn)品)Atorvastatin calcium質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
小鼠周神經(jīng)成纖維細(xì)胞(MPNF)(5×105)阿扎胞苷/5-氮雜胞嘧啶核苷(進(jìn)分)Azacitidine (5-Azacytidine)質(zhì)量規(guī)格:> 98%,進(jìn)分,Sigma A2385
Ha Fe細(xì)胞,羊膜細(xì)胞 人高分化腺癌細(xì)胞系,THC-8307細(xì)胞 CM-R045大鼠小腸粘膜上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL乙二安四乙酸三鉀鹽5毫克
大鼠肝細(xì)胞;BRL 3AD-谷酸 D-Glutamic acid,≥99% 6893-26-1 5G 通用試劑
MICB Others Human 人 MICB 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 區(qū)醋 Kojic ccid 201-30-4
人絨毛膜間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞HCMSC1,3-500克
FLRT2 Others Human 人 FLRT2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 本甲酰錄(*)Benzoyl chloride
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:七星庫道蟲PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。