產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4032 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
海魚分枝桿菌PCR檢測試劑盒價(jià)格 | Mycobacterium marinumPCR | BKP4032 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。
大鼠神經(jīng)元細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLBenzylbenzoate安息香酸芐酯100克AH-26類型
OK負(fù)鼠腎細(xì)胞 OK opossum kidney cells MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS2-噁坐同 99% 2-Oxczolidonq 497-2-6
IFNA14 Protein Mouse 重組小鼠 IFNA14 / Ierferon alpha-14 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)Anilinepluewatersoluble本胺蘭水溶25毫克GR,99.5%
MS751(人子宮頸表皮癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 Ana-1(巨噬細(xì)胞)Histone組蛋白100克BR,15-25u/mg,粉末
MGC80-3(MGC-803)人細(xì)胞L-Asparagine 50g/100g/500g/Sigma10g 國產(chǎn)
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KMY0909 人軟骨細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL頭孢呋辛鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)Cefuroxime 質(zhì)量規(guī)格:效價(jià)測定
水牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;WB-S5頭孢曲鈉Ceftriaxone 質(zhì)量規(guī)格:potency>980ug/mg,BR
IFNB1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IFNB1 / IFN-beta / Ierferon beta 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 頭孢曲鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)Ceftriaxone 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
CL-0197RL95-2(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×2頭孢他啶(含碳酸鈉)Ceftazidime with Carbonate 質(zhì)量規(guī)格:94.0-105.0%,USP,BR
Hut-78細(xì)胞,皮膚T細(xì)胞瘤 人平滑肌,T/G細(xì)胞 人低侵襲性脈絡(luò)膜色素素瘤細(xì)胞;OCM-1A頭孢唑啉鈉Cefazolin 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
海魚分枝桿菌PCR檢測試劑盒價(jià)格EJ(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 肺大平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)芍藥苷(50%)Paeoniflorin質(zhì)量規(guī)格:≥50%,BR
間充質(zhì)干細(xì)胞脂肪細(xì)胞分化培養(yǎng)基MADM-prf芍藥苷(90%)Paeoniflorin質(zhì)量規(guī)格:≥90%
CDCP1 Others Mouse 小鼠 CDCP1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 5,6-二甲基-1,10-菲咯啉(>98.0%(T))5,6-Dimethyl-1,10-phenanthroline質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)
大鼠完全培養(yǎng)基 100mL2,9-二丁基-1,10-鄰二氮雜菲(>96.0%(HPLC))2,9-Dibutyl-1,10-phenanthroline質(zhì)量規(guī)格:>96.0%(HPLC)
CTLA4 Ig-24細(xì)胞,中國倉鼠卵巢細(xì)胞 SK-OV-3 [SKOV-3](人細(xì)胞) CM-H002人肺大動脈內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL2,9-二苯基-1,10-菲咯啉(>98.0%(HPLC)(T))2,9-Diphenyl-1,10-phenanthroline質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T)
CL-0046C4-2(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×25--2-脫氧胞苷25克
HSC-T6, 大鼠肝星狀細(xì)胞系6-溴己醋 6-BroMohqxcnoic ccid;6-BroMoccproic ccid 44-70-8
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞(彝族);HYL 人腹膜內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLSILVERnitnATE肖酸銀蛋白組學(xué)級25GRT
牛腦垂體提取物BPE麗春紅2R100克2~8°C
EPHB2 Others Mouse 小鼠 EphB2 / Hek5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) POPSO 10g/100g原裝 Sigma P3405
特點(diǎn)優(yōu)勢:
1. 特異性:海魚分枝桿菌PCR檢測試劑盒價(jià)格使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時(shí)。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。