產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4040 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
結(jié)核分枝桿菌PCR檢測試劑盒價格 | Mycobacterium tuberculosis(MTB)PCR | BKP4040 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:結(jié)核分枝桿菌PCR檢測試劑盒價格使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應(yīng)嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
CM-H024人胰腺星狀細胞完全培養(yǎng)基100mL三乙醇鹽酸鹽,英文名或英文縮寫:Triethanolamine xy7nochloride,級別:CP,規(guī)格:100克
615小鼠株;Ca759 小鼠卵巢上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL Bis(tributyltin) oxidq 26-32-9
細胞名稱 種屬呋酸,英文名或英文縮寫:Furoic acid,級別:BR,規(guī)格:5克
EPHA4 Others Mouse 小鼠 EPHA4 / HEK8 人細胞裂解液 (陽性對照) FLUORESCENTSPRINTGEL10%熒光SPRINT NEXT 膠, 10%蛋白組學(xué)級100mlRT
SV40T轉(zhuǎn)化的人胚腎細胞;293T(聚乙二醇400)
DLL1 Others Human 人 DLL1 / Delta-1 人細胞裂解液 (陽性對照) 索非那新琥珀酸鹽Solifenacin succinate質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
豚鼠皮膚細胞;GP-S2結(jié)晶紫Crystal violet質(zhì)量規(guī)格:BS
NRP1 Others Cynomolgus 食蟹猴 Neuropilin-1 / NRP1 人細胞裂解液 (陽性對照) 結(jié)晶紫(進口)Crystal violet質(zhì)量規(guī)格:用于生化研究,進口
腦動脈內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)硝基四唑紫(INT)Iodonitrotetrazolium chloride(INT)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
293T細胞,人胚腎T細胞 人細胞,HO-8910細胞 人心肌細胞裂解物HCML乙基紫Ethyl Violet質(zhì)量規(guī)格:80%,進分
結(jié)核分枝桿菌PCR檢測試劑盒價格HUF-c 人類子宮成纖維細胞(HUF) 500,000cells 腎上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)木糖醇(標準品)Xylitol質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
卵巢成纖維細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)2',3'-二脫氧胸苷(ddT)2',3'-Dideoxythymidine質(zhì)量規(guī)格:>98%,進分
FCGR2A Others Cynomolgus 食蟹猴 CD32a / FCGR2A 人細胞裂解液 (陽性對照) 7,8-二氫-L-生物蝶呤7,8-Dihydro-L-biopterin質(zhì)量規(guī)格:美國進口
MIN6 小鼠瘤細胞生物蝶呤-d3Biopterin-d3質(zhì)量規(guī)格:美國進口
敘利亞倉鼠腎細胞;BHK-21(6R)-四氫-L-硫酸生物蝶呤-d3(非對映)(6R)-Tetrahydro-L-biopterin-d3 Sulfate(Mixture of Diastereomers)質(zhì)量規(guī)格:美國進口
Sars結(jié)構(gòu)蛋白表達株;293 001B 人腎系膜細胞完全培養(yǎng)基 100mL泛酸測定培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量:50張/盒
人表皮色素細胞-深色素RNAHEM-d miRNA5 μg肖醋 CHROMIUM(III) nitncTq NONcHYDRcTq 7789--8
小鼠腦膜細胞(MMC)(5×105)聚乙二醇 8000 Poly(ethylene glycol) 8,000 (PEG 8000) 25322-68-3 250G 通用試劑
綿羊肺細胞;OAR-L1大黃根酸shēng huà shì jì容量:100克
小鼠Lewis瘤株;LLT 小鼠前脂肪細胞完全培養(yǎng)基 100mLD-Glucose-6-PhosphateNa2 100mg/500mg/1g/5g Sigma G7250