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上海帛科生物技術有限公司
   
     
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鼠痘病毒PCR檢測試劑盒供應
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
  • 貨號:BKP4011
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-12
  • 更新日期: 2025-07-07
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進口、國產(chǎn)
品牌 帛科
貨號 BKP4011
用途 公司產(chǎn)品僅用物科研
包裝規(guī)格 50次
純度 %
CAS編號
是否進口

PCR實驗方法步驟:

方法
1
:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix
2mM             
4 μl     
引物110pM                 
2 μl     
引物210pM                 
2 μl     Taq
2U/μl               
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl  
1 μl     
ddH2O 50 μl  
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2
:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93 40s → 58 30s → 72 60s,循環(huán)30-35次,在72 7min。
3
:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4待電泳檢測或-20長期保存。
4
PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號

鼠痘病毒PCR檢測試劑盒供應

Mouse Pox Virus(MPV)PCR

BKP4011

技術服務內容:

實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。

特點優(yōu)勢:
1. 特異性:鼠痘病毒PCR檢測試劑盒供應使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
 2.   
重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3.   
靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4.   
實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5.   
優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

人肺大動脈平滑肌細胞完全培養(yǎng)基 100mLDL-谷酸25RT

A875細胞,人色素瘤細胞 阪崎腸桿菌 人紅系細胞;TF-1;玫紅三羧醋銨;金精三羧醋銨 cluMinon;curintriccrboxylic ccid tricMMoniuM sclt; 749-90-2

ANGPTL7 Protein Canine 重組狗 ANGPTL7 / Angiopoietin-like 7 蛋白 (His 標簽)D-環(huán)務基甘安醋 D-Cyclopqntylglycinq 21-86-0

KB(人口腔表皮樣癌細胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠 SELP / selectin P / P-selectin 人細胞裂解液 (陽性對照) A-KETOGLUTARICACID,FREEACIDα-酮戊二酸*白色至微黃色結晶或結晶粉末COLDsigma

非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS4A;Vero-HCV-NS4AN,N-二甲基-1,3-, 98+%3-Dimetxylaminopropylamine
ERAP2 Others Human
LRAP / ERAP2 人細胞裂解液 (陽性對照) 普魯卡因(標準品)Chloroprocaine hydrochloride質量規(guī)格:含量測定

原代平滑肌細胞特制基礎培養(yǎng)基Many types of cells包裝:500/250/100ml鹽酸乙哌立(標準品)Eperisone hydrochloride質量規(guī)格:含量測定

PDGFRB Others Human PDGFRB / CD140b 人細胞裂解液 (陽性對照) 孕三1酮(標準品)Gestrinone質量規(guī)格:含量測定

MDBK (NBL-1) 牛腎細胞西尼地平(標準品)Cilnidipine質量規(guī)格:HPLC>97%,標準品

CM-H002人肺大動脈內皮細胞完全培養(yǎng)基100mL西尼地平Cilnidipine質量規(guī)格:>97%,BR,可用于細胞培養(yǎng)
鼠痘病毒PCR檢測試劑盒供應人細胞;A549 [A-549] 人腦成纖維細胞完全培養(yǎng)基 100mL5-O-去甲基奧美拉唑硫化物5-O-Desmethyl Omeprazole Sulfide質量規(guī)格:美國進口

人肝竇內皮細胞cDNAHHSEC cDNA奧美拉唑 Omeprazole質量規(guī)格:>99%,USP33,BR,可用于細胞培養(yǎng)

小鼠胚胎成纖維細胞(MEF-mt)(5×105)奧美拉唑 (標準品)Omeprazole質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品

大鼠肝細胞;IAR20氯唑沙宗Chlorzoxazone質量規(guī)格:>98.5%,BR

小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-A2 小鼠肝外膽管上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL氯唑沙宗(標準品)Chlorzoxazone質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品
人子宮內膜腺癌細胞;HEC-1-B磺胺二甲氧嗪; 磺胺二甲氧基嘧啶質量規(guī)格:>99%,ARSulfadimethoxine

人成纖維母細胞-(HDF-a)( 5×105 )磺胺二甲氧基嘧啶(標準品)質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品Sulfadimethoxine

人星形膠質細胞奧斯他偉酸;奧司他韋羧酸質量規(guī)格:>97,BROseltamivir acid

人結直腸腺癌細胞;LoVo 大鼠輸尿管上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mLalpha-熊果苷(標準品)質量規(guī)格:HPLC98%,標準品alpha-Arbutin

PC-12(高分化) 大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(高分化)L-甲狀腺素鈉鹽五水化合物質量規(guī)格:>98%,BRL-Thyroxine  Salt Pentahydrate
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
引物擴增跨度: 200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
避免引物內部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.11umol10100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。


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