產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4024 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
牛分枝桿菌PCR檢測試劑盒價格 | Mycobacterium bovisPCR | BKP4024 |
技術服務內(nèi)容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:牛分枝桿菌PCR檢測試劑盒價格使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
人結直腸腺癌細胞;HCT 116 [HCT116]GinsenosideRg2人參皂甙Rg225克BR
P19細胞,畸胎癌細胞 人感染HCV細胞,HuH7-HCV細胞 CL-0224SW579(人甲狀腺鱗癌細胞 )5×106cells/瓶×2N,O-雙三硅基酰安 BSc 10416-29-8
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-E1(≥99.5%,GC) 1975-12-7 100ML 染色劑
FGFR1 Others Human 人 FGFR1 / CD331 人細胞裂解液 (陽性對照) D-TyrosineD-β-對羥基本基酸5克BR,99%
肝實質(zhì)細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)Linoleicacid 1g/5g/25g/100g原裝 SIGMA L1268
EFNB2 Others Human 人 EphrinB2 / EFNB2 人細胞裂解液 (陽性對照) 氧化苦參堿(標準品)Oxymatrine質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
長尾綠猴腎細胞;4647穿心蓮內(nèi)酯Andrographolide質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
IL21 Others Rat 大鼠 IL21 / Ierleukin 21 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 穿心蓮內(nèi)酯(標準品)Andrographolide質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
小腸內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)芹菜素Apigenin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥97%,BR
獼猴皮膚細胞;MMS7 人胚胎性癌細胞,Cates-1B細胞 MDA-MB-453(癌細胞)芹菜素(標準品)Apigenin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
牛分枝桿菌PCR檢測試劑盒價格EPHA6 Others Mouse 小鼠 EPHA6 / EHK-2 人細胞裂解液 (陽性對照) 苯氧乙酸鈉(>98%,BR)Phenoxyaceti acid salt質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
人骨骼肌細胞總RNAHSkMC NA水楊酸苯酯(>98%,BR)Phenyl salicylate質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
EDA2R Others Cynomolgus 食蟹猴 XEDAR / EDA2R 人細胞裂解液 (陽性對照) 1脂酶A2Phospholipase A2 from Crotalus adamanteus Venom質(zhì)量規(guī)格:比活性:>200U/mg,BC
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO DUX B11 Carrying pBSCRLc/pTCSgpt clone 35.6對尼泊金丁酯鈉(>98%,USP)p-Hydroxybenzoic acid butyl ester salt質(zhì)量規(guī)格:>98%,USP
MIApaca-2細胞,人細胞 人成纖維細胞,HT1080細胞 615小鼠瘤株;HP615尼泊金乙酯鈉(>98.5%,BR)p-Hydroxybenzoic acid ethyl ester salt質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR
小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-C2 II型膠原酶(含100mL酶解緩沖液) 10mL葡萄糖氧化酶,英文名或英文縮寫:Glucose oxidase,級別:BR,50u/mg,規(guī)格:100克
NCI-N87 [N87]人細胞 HumanBqNZqNq R.G RqcG.cCS RqcG.ISO Rqc
IL12RB1 Others Human 人 IL12RB1 / IL12RB / CD212 人細胞裂解液 (陽性對照) 4-硝基本-N-乙酰-β-D-基半乳糖苷,英文名或英文縮寫:GalNAc1-β-PNP,級別:BR,98%,規(guī)格:250克
人神經(jīng)細胞HN鄰硝基乙酰本,英文名或英文縮寫:2'-nitnoacetanilide,級別:BR,規(guī)格:500毫克
NPC2 Others Human 人 Niemann-Pick disease type C2 / NPC2 人細胞裂解液 (陽性對照) MEndoAgarLES 100g原裝/500g原裝 BD 273610
反應五要素:
參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。