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| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號 | BKP4045 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50次 |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
【產(chǎn)品名稱】: 牛支原體PCR檢測試劑盒直銷
【英文名稱】: Mycoplasma bovisPCR
【貨號】: BKP4045
【儲存條件及有效期】:
-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融，有效期6個月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運(yùn)輸】
u 樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；
u 存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h，-70℃以下可長期保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（最多凍融3次）；
u 運(yùn)輸：采用冰壺或泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑，如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒，也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。
組成及試劑配制:
酶標(biāo)板：一塊（96孔）
2、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。
牛支原體PCR檢測試劑盒直銷其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞中檢出一個靶細(xì)胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板?？芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
CSF1R Others Rat 大鼠 CSF1R / MCSF Receptor / CD115 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) BAANa-本甲酰-L-精酸1克BR，98%
肺大動脈平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)1.2.4-三氮坐puriss≥99.0% 1,2,4-Triczolq
LNCaP clone FGC細(xì)胞，細(xì)胞 人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞,AN3 CA細(xì)胞 人平滑肌細(xì)胞cDNAHPSMC cDNA分子篩，4A 型 MOLqCULcR SIqVq 6991-79-4
EB病毒轉(zhuǎn)化的絨猴細(xì)胞;B95-8LACTOSE乳糖美國國家處方級 12KG
GZMB Others Human 人 Granzyme B / GZMB 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 693-13-0N,N'-二異丙基碳二亞胺n,n`-diisopropylcarbodiiMide
CXCL9 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CXCL9 / MIG / C-X-C motif chemokine 9 蛋白三十一烷(Standard for GC≥97.0%(GC))Hentriacontane質(zhì)量規(guī)格：Standard for GC≥97.0%(GC)
NCI-H292(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 甲型 H5N1 (A/bar-headed goose/Qinghai/1A/2005) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 二十六烷(分析標(biāo)準(zhǔn)品, ≥99.5% (GC))Hexacosane質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品, ≥99.5% (GC)
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-D22,5-己二酮(standard for GC,≥99%(GC))2,5-Hexanedione質(zhì)量規(guī)格：standard for GC,≥99%(GC)
ALOX15B Others Human 人 ALOX15B / 15 Lipoxygenase 2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 2,5-己二酮(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC))2,5-Hexanedione質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC)
膀胱平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)3',3'',5',5''-四溴酚酞乙酯(80%,用于顯微鏡)3',3'',5',5''-Tetrabromophenolphthaleinethyl ester質(zhì)量規(guī)格：80%,用于顯微鏡
牛支原體PCR檢測試劑盒直銷NRK-52E，大鼠腎細(xì)胞 RattusD-木糖D-(+)-Xylose 質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR
EFNA5 Others Mouse 小鼠 EFNA5 / Ephrin-A5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) N-乙?；前芳讗哼?/span>N-Acetyl Sulfamethoxazole質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
人腸平滑肌細(xì)胞HISMC磺胺甲惡唑 β-D-葡萄糖苷酸Sulfamethoxazole β-D-Glucuronide質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
HA Others H7N8 甲型 H7N8 (A/mallard/Netherlands/33/2006) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 頭孢匹羅Cefpirome質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
豬腎細(xì)胞;PK(15)阿米舒必利-d5Amisulpride-d5質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
PC-3細(xì)胞，人細(xì)胞 人表皮癌細(xì)胞,A-431細(xì)胞 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;BALB/C 3T3色胺100克
Hs 746T(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×22-酚-3,7-二磺酸... 2-Naphthol-3,7-disulfonic a... 83949-45-5 1G 通用試劑
Gibco 17100017 Collagenase Type I 1g肖醋(*) litxium nitnctq
人晶狀體上皮細(xì)胞裂解物HLEpiCLGUANIDINEHCL,8MSOLUTION鹽酸胍, 8M 溶液蛋白組學(xué)級4LRT
ALDH3A1 Others Human 人 ALDH3A1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 91-40-7N-本基代鄰基本N-pxenylentxnenili ei7
PCR檢測試劑盒：
牛支原體PCR檢測試劑盒直銷 (一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中，按100g:3ml的比例加入Trizol試劑，嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg組織，寧多勿少）置于玻璃勻漿器中勻漿后，冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中，4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol，振蕩15s，室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol，振搖，置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min，EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清，紙巾吸干，加入75%乙醇1ml，振搖，充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇，空氣干燥10min（可離心加快干燥，盡量吸盡離心液體）。
(12)半透明時(shí)將RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混勻），-20oC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度，所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳，顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
