產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP4077 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
【產(chǎn)品名稱】: 畸形細(xì)頸線蟲PCR檢測(cè)試劑盒直銷
【英文名稱】: Nematodirus abnormalisPCR
【貨號(hào)】: BKP4077
【儲(chǔ)存條件及有效期】:
-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融,有效期6個(gè)月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運(yùn)輸】
u 樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
u 存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h,-70℃以下可長(zhǎng)期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(最多凍融3次);
u 運(yùn)輸:采用冰壺或泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑,如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒,也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。
組成及試劑配制:
酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測(cè)稀釋液B:1×10ml。
畸形細(xì)頸線蟲PCR檢測(cè)試劑盒直銷其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測(cè)中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
雜交瘤(B類);Z172A4C4C6F3G12TCPA四錄本酐25克CP,99.5%
FSTL1 Others Human 人 FSL1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 3-異青醋酯基炳基三氧基硅烷 3-Isocycnctopropyltrimqthoxysilcnq 12396-00-6
巨噬細(xì)胞培養(yǎng)基MaMSorbicacid2,4-己二1酸500毫克高,98%
SERPINB1 Others Human 人 SerpinB1 / ELANH2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) DL-IsoleucineDL-異白酸5克BR,98%
人正常細(xì)胞;Hs 578Bst1979-7-22-錄乙酰胺;錄乙酰胺2-ChloroacetaMideClCH2CONH2;2-ChloroethanaMide
CGA Others Human 人 FSH alpha / TSH alpha / CGA 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 紫杉醇Paclitaxel質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,用于細(xì)胞培養(yǎng),藥劑造模
敘利亞倉鼠皮膚細(xì)胞;GH-S1紫杉醇(標(biāo)準(zhǔn)品)Paclitaxel質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
人APP-PS1(M146L)雙基因轉(zhuǎn)染CHO細(xì)胞株;7WML6.0 癌細(xì)胞,MDA-MB-453細(xì)胞 GIK細(xì)胞,草魚腎細(xì)胞系鹽酸帕洛諾司瓊Palonosetron HCl質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
人皮膚成纖維細(xì)胞;CCC-HSF-1硫酸巴龍霉素Paromomycin Sulfate質(zhì)量規(guī)格:≥675 U/mg,USP28
HA Others H9N2 甲型 H9N2 (A/Guinea fowl/Hong Kong/WF10/99) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 硫酸巴龍霉素(標(biāo)準(zhǔn)品)Paromomycin Sulfate質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定
畸形細(xì)頸線蟲PCR檢測(cè)試劑盒直銷CD40 Others Mouse 小鼠 CD40 / TNFRSF5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 碲標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,基體:HCI)Tellurium standard質(zhì)量規(guī)格:100μg/ml,基體:HCI
MSTO-211H 人細(xì)胞株銩標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/mL,基體:10%HCL)Thulium standard質(zhì)量規(guī)格:1000μg/mL,基體:10%HCL
NCI-H1299人非小細(xì)胞細(xì)胞 NCI-H1299 cells in human non small cell lung cancer RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS釩標(biāo)準(zhǔn)溶液(500mg/L,溶劑:水)Vanadium standard質(zhì)量規(guī)格:500mg/L,溶劑:水
GRN Protein Mouse 重組小鼠 Granulin / GRN / Progranulin 蛋白 (His 標(biāo)簽)釩標(biāo)準(zhǔn)溶液(100mg/L,基體:1%HCI)Vanadium standard質(zhì)量規(guī)格:100mg/L,基體:1%HCI
人胚肺二倍體細(xì)胞;KMB-17 人甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL鐿標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml)Ytterbium standard質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml
CSF2 Protein Rat 重組大鼠 GM-CSF / CSF2 蛋白 (His 標(biāo)簽)1,5,9-三氮雜環(huán)十二烷(>90.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>90.0%(GC)1,5,9-Triazacyclododecane
T-24(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 甲型 H5N1 (A/common magpie/Hong Kong/5052/2007) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 1,4,7-三氮雜環(huán)壬烷(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)1,4,7-Triazacyclononane
人外根殼細(xì)胞cDNAHHORSC cDNA1,4,7-三甲基-1,4,7-三氮雜環(huán)壬烷(含穩(wěn)定劑碳酸氫鈉)質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T)1,4,7-Trimethyl-1,4,7-triazacyclononane (stabilized with NaHCO3)
SELP Others Rat 大鼠 SELP / selectin P / P-selectin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 1,4,8,11-四硫代環(huán)十四烷(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)1,4,8,11-Tetrathiacyclotetradecane
小鼠腹水瘤細(xì)胞;S-1801,4,7-三硫雜環(huán)壬烷(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)1,4,7-Trithiacyclononane
PCR檢測(cè)試劑盒:
畸形細(xì)頸線蟲PCR檢測(cè)試劑盒直銷 (一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時(shí)將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20oC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。