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犬新孢子蟲PCR檢測試劑盒供應(yīng)【儲存條件及有效期】:
-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融，有效期6個月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運(yùn)輸】
u 樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；
u 存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h，-70℃以下可長期保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（最多凍融3次）；
u 運(yùn)輸：采用冰壺或泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑，如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒，也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。

【產(chǎn)品名稱】: 犬新孢子蟲PCR檢測試劑盒供應(yīng)
【英文名稱】: Neospora caninumPCR
【貨號】: BKP4083
組成及試劑配制

酶標(biāo)板：一塊（96孔）
2、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。

犬新孢子蟲PCR檢測試劑盒供應(yīng)其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞中檢出一個靶細(xì)胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板?？芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。

NCI-H2170(人肺鱗癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2Gly-lleu甘酰-L-異亮酸1克BR，98%

BRL(大鼠肝細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CM-M054小鼠子宮成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;Caco-23,4-二安基本加醋;3,4-二安基安息香醋 3,4-DicMinobqnzoic ccid 619-02-6

恒河猴皮膚細(xì)胞;RM-S1Fmoc-D-Cys(Trt)-OHN-Fmoc-N'-三本甲基- D-半胱酸25克特，98%

NCF2 Others Human 人 NCF2 / NCF-2 / P67phox 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 快速1試驗(yàn)瓊脂shēng huà shì jì容量：2～8℃100毫升

胰腺星狀細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)胞苷-5’-二1酸鈉鹽NA
CD63 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD63 / Tspan-30 / Teaspanin-30 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 異甘草素（標(biāo)準(zhǔn)品）Isoliquiritigenin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

粘膜上皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)人參皂苷Re(標(biāo)準(zhǔn)品)Ginsenoside Re質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

MEF-7/Adr細(xì)胞，腺癌阿霉素耐藥株 人細(xì)胞,HOC1細(xì)胞 人成纖維細(xì)胞裂解物HMFL人參皂苷F4,人參皂苷Rg4Ginsenoside F4質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

恒河猴腎細(xì)胞;LLC-MK2人參皂苷RK3(標(biāo)準(zhǔn)品)Ginsenoside RK3質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品

ICAM3 Others Human 人 CD50 / ICAM3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 人參皂苷RH4Ginsenoside RH4質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
B3G2 Others Human 人 B3G2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 朝藿定A(標(biāo)準(zhǔn)品）Epimedin A質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

人髂動脈內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL朝藿定A1(標(biāo)準(zhǔn)品)Epimedin A1質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

L929細(xì)胞，小鼠成纖維細(xì)胞 3T3-L1(小鼠脂肪細(xì)胞) 小鼠細(xì)胞;BC3H1朝藿定B（標(biāo)準(zhǔn)品）Epimedin B質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

CSF1 Protein Human 重組人 / 食蟹猴 M-CSF / CSF-1 蛋白 (His 標(biāo)簽)朝藿定C（標(biāo)準(zhǔn)品）Epmedin C質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

TF-1(人血液細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠細(xì)胞;BC3H1橙黃決明素(標(biāo)準(zhǔn)品)Aurantio-obtusin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
犬新孢子蟲PCR檢測試劑盒供應(yīng)CL-0352HFF-1(人成纖維細(xì)胞)5×106cells/瓶×2多聚嶙酸鈉500毫克

MEF, 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞偶氮二異務(wù)晴 2,2'-czodi(2-mqthylbutyronitnilq) 1347-08-7

人胚肺二倍體細(xì)胞;HEL-2 人胎盤羊膜細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL十九烷5克

人氣管平滑肌細(xì)胞RNAHTSMC miRNA5 μg本酸脫羧酶培養(yǎng)基10克RT

CAMK1G Others Human 人 CAMK1G / CLICK III / CaMKIgamma 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 2420-87-33,3’4,4’-聯(lián)本四羧酸二酐3,3',4,4'-Bipxenyltetracarboxylic dianhydride

PCR檢測試劑盒

 (一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中，按100g:3ml的比例加入Trizol試劑，嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg組織，寧多勿少）置于玻璃勻漿器中勻漿后，冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中，4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol，振蕩15s，室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol，振搖，置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min，EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清，紙巾吸干，加入75%乙醇1ml，振搖，充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇，空氣干燥10min（可離心加快干燥，盡量吸盡離心液體）。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混勻），-20oC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度，所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳，顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。