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上海帛科生物技術有限公司
   
     
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問號鉤端螺旋體PCR檢測試劑盒直銷
  • 品牌:帛科
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:BKP3941
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-12
  • 更新日期: 2024-11-25
產品詳請
產地 進口、國產
品牌 帛科
貨號 BKP3941
用途 公司產品僅用物科研
包裝規(guī)格 50次
純度 %
CAS編號
是否進口

PCR實驗方法步驟:

方法
1
:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix
2mM             
4 μl     
引物110pM                 
2 μl     
引物210pM                 
2 μl     Taq
2U/μl               
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl  
1 μl     
ddH2O 50 μl  
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2
:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93 40s → 58 30s → 72 60s,循環(huán)30-35次,在72 7min
3
:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產物放置于4待電泳檢測或-20長期保存。
4
PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

產品名稱

英文名稱

貨號

問號鉤端螺旋體PCR檢測試劑盒直銷

Leptospira interrogansPCR

BKP3941

技術服務內容:

實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。

特點優(yōu)勢:
1. 特異性:問號鉤端螺旋體PCR檢測試劑盒直銷使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析,經過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
 2.   
重現(xiàn)性:該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3.   
靈敏性:該系列產品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4.   
實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5.   
優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

CSF1 Others Mouse 小鼠 M-CSF / CSF-1 人細胞裂解液 (陽性對照) N-Fmoc-L-AsparagineN-芴甲氧羰基-L-天冬酸100克特,98%

人胚;CCC-HPF-13--2-基炳1;γ-錄異;1炳基錄;異基錄 3-Chloro-2-Mqthylpropqnq;β-Mqthcllyl chloridq;Isobutqnyl chloridq;3-Chloro-2-Mqthyl-1-propqnq 263-47-3

GES細胞,人腎上皮細胞 小鼠B細胞,WEHI 231細胞 CL-0454TE-11(人細胞)5×106cells/瓶×2MMA甲基敗脂酸100CP,98%

H-97(人高轉移細胞) 5×106cells/瓶×22-脫氧胞苷25

hCD34+-CB-c pooled 臍帶血來源的人類造血祖細胞,混合來源 100000 人脊柱間充質干細胞HVMSC145-50-6α-酚醌本基p-Naphtholbenzein
IL13 Protein Human
重組人 IL13 / ALRH 蛋白 (Fc 標簽)人參皂苷Rg5GinsenosideRg5質量規(guī)格:HPLC95%,對照品

人肺動脈平滑肌細胞(HPASMC) ( 5×105 ) RDFs, 大鼠真皮成纖維細胞 Rattus兒茶素沒食子酯酸CG質量規(guī)格:HPLC98%,標準品

兔主動脈平滑肌細胞;CCC-SMC-2氯化鎂銨,氯化銨鎂,六水合氯化鎂銨AMMoniuM MagnesiuM chloride質量規(guī)格:CP

IL27 Others Mouse 小鼠 IL27 / Ierleukin-27 人細胞裂解液 (陽性對照) 訶子林鞣酸Chebulinic acid質量規(guī)格:HPLC96%,標準品

人上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL訶子鞣質,訶子鞣酸Chebulagic acid質量規(guī)格:HPLC96%,標準品
問號鉤端螺旋體PCR檢測試劑盒直銷IL4 Protein Canine 重組狗 IL4 / Ierleukin-4 蛋白硫酸銨Ammonium sulfate質量規(guī)格:>99%,分子生物學級

人成纖維母細胞-胎兒(HDF-f)( 5×105 ) MSC, 小鼠雪旺細胞 Mouse氯化銫Cesium chloride質量規(guī)格:>99%,分子生物學級

口腔角質細胞培養(yǎng)基OKM-prf6α-甲基21-醋酸鹽6α-Methylprednisolone 21-Acetate質量規(guī)格:美國進口

RET Others Human RET Kinase (aa 658-1114) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) N-去甲伊馬替尼-d8N-Desmethyl Imatinib-d8質量規(guī)格:美國進口

人胚腎細胞-F克隆;293FN-去甲伊馬替尼N-Desmethyl Imatinib質量規(guī)格:美國進口
人癌細胞;SK-BR-34--2,3-二甲基偶氮本500毫升RT

EFNB3 Others Rat 大鼠 Ephrin-B3 / EFNB3 人細胞裂解液 (陽性對照) 錄酚紅 chlorophqnol rqd 4430-0-0

F344大鼠骨髓間質干細胞 F344 rat bone marrow mesenchymal stem cellsβ-甘油1酸鈉 β-Glycerophosphate di (BioUltra... 154804-51-0 10G 通用試劑

U373細胞,人腦細胞系 福氏志賀氏菌(Shigella flexneri) 人無色素睫狀上皮細胞RNAHNPCEpiC miRNA5 μgGLYCYLGLYCINE雙甘二肽*白色精細粉末RTsigma

SK-N-BE(2) (人神經母細胞瘤細胞) 5×106cells/瓶×2DTT 1g/2g/5g Amresco分裝
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
引物擴增跨度: 200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
避免引物內部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.11umol10100pmol,以*引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。


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