產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP3983 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
曼那角病毒PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng) | Menangle virusRTPCR | BKP3983 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
HO-8910 人細(xì)胞SSPEBUFFER,0.1X,WITH0.2%SDS 0.1X SSPE 緩沖液,含 0.2% SDS超級(jí)透明無色液體RTsigma
ZR-75-30人癌細(xì)胞 Human breast cancer cell line ZR-75-30 RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS1,3-二流代坊 97% 1,3-DITHIOLcNq 489-4-3
FIGF Protein Rat 重組大鼠 VEGF-D / VEGFD / FIGF 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)言醋二雙胍相關(guān)物質(zhì)B MqtforMin Rqlctqd CoMpound B;1-Mqthylbigucnidq xy7nochloridq 1674-6-0
大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞(RA)(5×105) Caki-1, 人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞 Human二乙二醇單[(1,1,3,3-四甲基丁基)本基],英文名或英文縮寫:Triton x-114,級(jí)別:BR,85%,規(guī)格:100毫克
非洲綠猴腎細(xì)胞;VERO C1008 (E6)Adenosine 10g/25g/50g/100g Amresco 0325
HAVCR2 Others Human 人 TIMD3 / TIM3 / HAVCR2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 鹽酸多佐胺;鹽酸杜塞酰胺(標(biāo)準(zhǔn)品)Dorzolamide HCl質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
魚源細(xì)胞甲磺酸多沙唑嗪Doxazosin Mesylate質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
HA Others H3N2 甲型 H3N2 (A/Perth/16/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 甲磺酸多沙唑嗪(標(biāo)準(zhǔn)品)Doxazosin Mesylate質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
II型膠原酶(含10mL酶解緩沖液) 1mL鹽酸多柔比星/鹽酸阿霉素Doxorubicin HCl/Adriamycin質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
U-373MG-EGFP(Ubc-EGFP慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)人 U-373MG-EGFP (Ubc-EGFP leiviral consuct stable sain) of human brain glioma cells DMEM+10% FBS鹽酸多柔比星/鹽酸阿霉素(標(biāo)準(zhǔn)品)Doxorubicin HCl/Adriamycin質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
曼那角病毒PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)GP1BB Others Human 人 GP1Bβ / CD42c 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 阿托伐醌,阿托喹酮(標(biāo)準(zhǔn)品)Atovaquone質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
人肺巨細(xì)胞癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞株;PG-BE1阿昔洛韋鈉鹽Acyclovir 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
CLEC10A Others Mouse 小鼠 CLEC10A / MGL1 / CD301 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 阿昔洛韋單1酸鹽Acyclovir Monophosphate 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
COLO320/DM 人細(xì)胞阿昔洛韋-d4Acyclovir-d4 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
HCT 116人細(xì)胞 HCT 116 human colon cancer cells MycCoy's 5A+10%FBSN2-乙?;?/span>-9-(2-乙酰氧基乙氧基甲基)鳥嘌呤(阿昔洛韋雜質(zhì))N2-Acetyl-9-(2-acetoxyethoxymethyl)guanine (Acyclovir Impurity)質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
Promocell C-24305 Melanocyte Growth Medium M2 (prf), 色素細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)基M2型套裝,無酚紅 500mlDIOP鄰本二酸二辛酯100克CP,94%
平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基SMCM-sf-prfdl-alpha-基色安 3-(2-cMINOPROPYL)INDOLq 1999/6/3
HDAC3 Others Human 人 HDAC3 / Histone deacetylase 3 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) DAOS
轉(zhuǎn)化細(xì)胞STREPTAVIDIN鏈霉親合素生物技術(shù)級(jí)25MG
P3X63Ag8細(xì)胞,細(xì)胞 人十二指腸腺癌細(xì)胞,HuTu-80細(xì)胞 CM-H029人臍帶單核細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL3012-65-5檸檬酸氫二銨;枸櫞酸氫二銨;二堿式檸檬酸銨AMMoniuM dibasic;AMMoniuM xy7nogen ;Citric acid diaMMoniuM salt
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:曼那角病毒PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。