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| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號 | BKP4075 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50次 |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
奈瑟菌PCR檢測試劑盒供應(yīng) | Neisseria meningitidisPCR | BKP4075 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。
人正常細(xì)胞;Hs 578BstAVIDIN,CHICKENEGGWHITE親合素試劑級白色凍干粉FROZENsigma
PVRL1 Others Human 人 PVRL1 / HVEC / CD111 / Nectin-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 四丁基氫銨 Tetrabutylammonium hydrogensulfate,97% 32503-27-8 25G 通用試劑
成骨細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)灰皇每速 Grisqofulvin;cMudcnq;Curling fcctor;Fulcin;Fulvicin;Grifulvin;Griscct 2016/7/8
CD300LG Others Human 人 CLM-9 / EM4 / CD300LG 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) NAOH-SDSLYSISSOLUTION裂解液,NaOH/SDS超級透明液體RT不sigma
人急性單核細(xì)胞細(xì)胞;THP-1二氧化Lead dioxide
CHL1 Others Mouse 小鼠 CHL-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 頭孢磺啶鈉Cefsulodine 質(zhì)量規(guī)格：Cefsulodine> 864μg /mg,BR
CM-R106大鼠神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL鄰苯二o-Phthalaldehyde質(zhì)量規(guī)格：>97%,BR
KYSR450細(xì)胞，人細(xì)胞 人XG惡性細(xì)胞,SF-295細(xì)胞 豬內(nèi)皮細(xì)胞;ZYM-SVEC01醋酸美倫孕酮; 甲1雌醇乙酸酯Melengestrol acetate質(zhì)量規(guī)格：USP
CHL(倉鼠肺細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2膽酯酶;膽甾醇酯酶Cholesterol esterase 質(zhì)量規(guī)格：>300 U/mg,進(jìn)分
CD27 Others Human 人 CD27 / TNFRSF7 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 1,9-吡唑并蒽酮;SP600125SP600125質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,進(jìn)分,JNK抑制劑
奈瑟菌PCR檢測試劑盒供應(yīng)PADI4 Others Human 人 PAD4 / PADI4 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) L-亮氨酸乙酯鹽酸鹽H-Leu-OEt·HCl質(zhì)量規(guī)格：>98%
615小鼠株;Ca763L-苯丙氨酸乙酯鹽酸鹽H-Phe-OEt.HCl質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
MC3T3-E1 Subclone 14細(xì)胞，小鼠原成骨細(xì)胞 人細(xì)胞系,LM-6細(xì)胞 CL-0112HMy2.CIR(人B母細(xì)胞)5×106cells/瓶×2甘氨酸乙酯鹽酸鹽Glycine ethyl ester hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
中國倉鼠肺細(xì)胞;CHLL-蛋氨酸乙酯鹽酸鹽;L-甲硫氨酸乙酯鹽酸鹽L-Mine ethyl ester hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：>98%(T),BR
TNFRSF1A Others Human 人 TNFRSF1A / TNFRI / CD120a 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) L-酪氨酸乙酯鹽酸鹽L-Tyrosine ethyl ester hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格：0.98
小鼠漿細(xì)胞瘤;MPC-11HRP標(biāo)記羊抗人纖維蛋白shēng huà shì jì容量：RT2000只/箱
PDGFRB Others Human 人 CD140b / PDGFRB 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 鱗晴基P4-t-Bu四拂硼醋鹽 ≥97.0% (NMR) 1-TqRT-BUTYL-4,4,4-TRIS(DIMqTHYLcMINO)-2,2-BIS[TRIS(DIMqTHYLcMINO) PHOSPHORcNYLIDq-NcMINO]-2LcMBDc5,4LcMBDc5-CcTqNcDI(PHOSPHcZqNIUM) BF4 181471-6-2
人急性單核細(xì)胞細(xì)胞;THP-1己二酸二乙酯shēng huà shì jì容量：保存：-20℃5毫升
PDGFRA Others Human 人 PDGFRa / CD140a 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) D，E中和肉湯shēng huà shì jì容量：RT250克
CL-0453TE-10(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×22106-4-93-錄-2-扶本胺3-Chloro-2-fluoroaniline
特點(diǎn)優(yōu)勢：
1. 特異性：奈瑟菌PCR檢測試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證，重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性：該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí)，可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌，可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個(gè)檢測過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。
