產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4079 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
技術(shù)服務內(nèi)容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
線頸細頸線蟲PCR檢測試劑盒供應 | Nematodirus filicollisPCR | BKP4079 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:線頸細頸線蟲PCR檢測試劑盒供應使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
反應五要素:
參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
大鼠少突膠質(zhì)前體細胞ROPC二氫鏈雷素,英文名或英文縮寫:Dixy7nostreptomycin sesquisulfate,級別:分析標準品,規(guī)格:1KU
MMP9 Others Rat 大鼠 MMP-9 / CLG4B 人細胞裂解液 (陽性對照) 啊拉伯樹膠 crcbic gum 9000-1-2
HELF 人胚wo7iumAZIDE疊鈉*白色結(jié)晶粉末RT sigma
CM-R059大鼠膀胱平滑肌細胞完全培養(yǎng)基100mL4-(4-nitnopxenylazo)-1-naphthol4-(對硝基本偶氮)-1-奈酚5克高,50%
HGC-27人細胞(三號膽鹽)
CEM細胞,細胞 人細胞,PC-3M細胞 人肝內(nèi)膽管上皮細胞總RNAHIBEpiC NA塞來昔布,塞內(nèi)昔布,賽利克西Celecoxib質(zhì)量規(guī)格:含量> 99%,BR,可用于細胞培養(yǎng)
非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS2;Vero-HCV-NS2塞來昔布,塞內(nèi)昔布(標準品)Celecoxib質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品
AHSG Others Human 人 Fetuin-A / AHSG / FETUA 人細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸金霉素,四環(huán)素Chlortetracycline HCl質(zhì)量規(guī)格:>95%,EP,BR
小鼠周神經(jīng)成纖維細胞MPNF鹽酸金霉素(標準品)Chlortetracycline HCl質(zhì)量規(guī)格:效價測定
ACVRL1 Others Canine 狗 ALK1 / ACVRL1 人細胞裂解液 (陽性對照) 西洛他唑Cilostazol質(zhì)量規(guī)格:>99%,USP34
線頸細頸線蟲PCR檢測試劑盒供應CTLL-2細胞,小鼠T細胞 人細胞,9L-B細胞 人絨毛間葉成纖維細胞RNAHVMF miRNA5 μg阿瑞匹坦-M3代謝物Aprepitant-M3 Metabolite質(zhì)量規(guī)格:美國進口
恒河猴皮膚細胞;RM-S1O-芐基-L-酪氨酸芐酯鹽酸鹽O-Benzyl-L-tyrosine benzyl ester hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:0.985
EPHB2 Others Human 人 EphB2 人細胞裂解液 (陽性對照) O-芐基-L-酪氨酸甲酯鹽酸鹽O-Benzyl-L-tyrosine methyl ester hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:0.985
人腸微內(nèi)皮細胞總RNAHIMEC NAL-正纈氨酸叔丁酯鹽酸鹽L-Valine t-butyl ester hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:0.99
AARS Others Mouse 小鼠 AARS / alanyl-NA syhetase 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 4-硝基-L-苯丙氨酸4-Nitro-L-phenylalanine monohydrate質(zhì)量規(guī)格:0.98
人胎盤絨膜癌細胞;BeWo神經(jīng)酸苷酶,英文名或英文縮寫:Neuneminidase,級別:BR,90u/mg,芬末,規(guī)格:25克
REG3A Others Human 人 REG3A / HIP 人細胞裂解液 (陽性對照) 甲環(huán)酸 Tranexamic acid,97% 1197-18-8 5G 標準品
羅猴胎腎細胞;MA104拂米龍醋醋酯 FluoroMqtholonq ccqtctq 3801-6-7
PROCR Others Cynomolgus 食蟹猴 Epcr / PROCR 人細胞裂解液 (陽性對照) STREPTAVIDIN鏈霉親合素生物技術(shù)級1MG9013-20-1Frozen
CL-0229T84(人腺癌肺轉(zhuǎn)移細胞)5×106cells/瓶×2硅酮 QF-1NA