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| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號(hào) | BKP4082 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50次 |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
【產(chǎn)品名稱】: 細(xì)頸線蟲通用PCR檢測(cè)試劑盒說明書
【英文名稱】: Nematodirus spp.PCR
【貨號(hào)】: BKP4082
【儲(chǔ)存條件及有效期】:
-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融，有效期6個(gè)月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運(yùn)輸】
u 樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；
u 存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h，-70℃以下可長(zhǎng)期保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（最多凍融3次）；
u 運(yùn)輸：采用冰壺或泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑，如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒，也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。
組成及試劑配制:
酶標(biāo)板：一塊（96孔）
2、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測(cè)稀釋液B：1×10ml。
細(xì)頸線蟲通用PCR檢測(cè)試劑盒說明書其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞；在病毒的檢測(cè)中，PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板?？芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
CM-M088小鼠破骨細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL乙二酸鍶，英文名或英文縮寫：Strontium oxalate，級(jí)別：CP，69%，規(guī)格：250毫升
A549/DDP, 人肺腺癌耐藥細(xì)胞株 小細(xì)胞細(xì)胞,LIEP-P細(xì)胞 DT40(雞瘤細(xì)胞)7-氧基-2-四輕同 7-Mqthoxy-2-tqtrclonq 4133-34-0
小鼠細(xì)胞;BC3H1(-)-薄荷醇，英文名或英文縮寫：Menthol，級(jí)別：CP，70%，規(guī)格：25克
CTLA4 Others Human 人 CTLA4 / CD152 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 2′-脫氧尿苷-5′-三嶙酸四鈉鹽5克
tTA基因修飾的小鼠(B類);P19-CAG-tTA-1D3(15-30萬)(多聚-L-賴酸)
CD69 Others Human 人 CD69 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) Tigecycline質(zhì)量規(guī)格：含量>99.0%
小鼠B細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞;W6/32（標(biāo)準(zhǔn)品）Tigecycline質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
TDGF1 Others Rat 大鼠 Cripto / TDGF1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 替米考星Tilmicosin質(zhì)量規(guī)格：干品度≥90.0%，干品含量≥85.0%，USP34
原代肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝：1ml替米考星(標(biāo)準(zhǔn)品)Tilmicosin質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定
RCC-krause細(xì)胞，細(xì)胞 人細(xì)胞,CaSKi細(xì)胞 人內(nèi)根殼細(xì)胞總RNAHHIRSC NA馬來酸噻嗎洛爾Timolol Maleate質(zhì)量規(guī)格：>99%,USP
細(xì)頸線蟲通用PCR檢測(cè)試劑盒說明書人上皮細(xì)胞;Hep-2 大鼠食管平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL乙酰唑胺Acetazolamide質(zhì)量規(guī)格：>99%
腦膜細(xì)胞培養(yǎng)基MenCM-prfBr-Mmc (=4-溴甲基-7-甲氧基)(>98.0%(T))Br-Mmc (=4-Bromomethyl-7-methoxycoumarin)質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T)
SCN3B Others Human 人 SCN3B 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 3-溴甲基-7-甲氧基-1,4-苯并惡嗪-2-酮(>98.0%(T))3-Bromomethyl-7-methoxy-1,4-benzoxazin-2-one 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T)
大鼠肺大動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL4-溴甲基-6,7-二甲氧基(>98.0%(HPLC))4-Bromomethyl-6,7-dimethoxycoumarin 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)
BLU-87 人膀胱移行細(xì)胞癌 BLU-87 human bladder ansitional cell carcinoma RPMI1640 (內(nèi)含2mM-glutamine)+10%胎牛血清 DBD-CO-Hz [=4-(N,N-二甲基氨基磺酰)-7-(N-肼基羰甲基-N-甲基)氨基-2,1,3-苯并惡二唑](>98.0%(HPLC))
雜交瘤(B類);Z51B3C10H12A12G2F7B5TES；Tris乙磺酸,2-[（三（羥甲基）甲基）氨基]-1-乙磺酸質(zhì)量規(guī)格：>99%,ARTES
中國(guó)倉鼠卵巢細(xì)胞系;CHO-TGF-beta-3/2000 Carrying Psv2-beta-TGF 肥大細(xì)胞瘤細(xì)胞，P815細(xì)胞 INS-1細(xì)胞，大鼠細(xì)胞3-[ (N-三(羥甲基)甲氨基]-2-羥基丙磺酸鈉質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRTAPSO mono
293來源病毒包裝細(xì)胞;ΦA-GPTAPSO；3-[ (N-三(羥甲基)甲氨基]-2-羥基丙磺酸質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRTAPSO
STIM1 Others Human 人 STIM1 / GOK 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) N-三(羥甲基)甲基-3-氨基丙磺酸鈉質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRTAPS Salt
神經(jīng)元細(xì)胞Many types of cells包裝：5 ×105方(1ml)S-I-G-S-L-A-K質(zhì)量規(guī)格：>95%,BRS-I-G-S-L-A-K
PCR檢測(cè)試劑盒：
細(xì)頸線蟲通用PCR檢測(cè)試劑盒說明書 (一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中，按100g:3ml的比例加入Trizol試劑，嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg組織，寧多勿少）置于玻璃勻漿器中勻漿后，冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中，4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol，振蕩15s，室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol，振搖，置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min，EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清，紙巾吸干，加入75%乙醇1ml，振搖，充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇，空氣干燥10min（可離心加快干燥，盡量吸盡離心液體）。
(12)半透明時(shí)將RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混勻），-20oC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度，所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳，顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
