產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3939 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
技術服務內(nèi)容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
同豬生殖與呼吸綜合癥病毒歐洲株PCR檢測試劑盒供應 | Lelystad Virus(LV,)RTPCR | BKP3939 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:同豬生殖與呼吸綜合癥病毒歐洲株PCR檢測試劑盒供應使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
反應五要素:
參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
H4-II-E-C3(大鼠細胞 ) 5×106cells/瓶×2乙酰,英文名或英文縮寫:IAM,級別:BR,98%,規(guī)格:5克
HCM Pellet 人類心肌細胞團塊 > 1 mio.cells 人真皮成纖維細胞-新生兒總RNAHDF-n NA2-基;β-基 2-Mqthylncphclqnq 91-27-6
T-105BIII型膠原酶(含100mL酶解緩沖液)10mL嶙酸1醇式酸羧化酶,英文名或英文縮寫:PEPC,級別:生物技術級,98%,規(guī)格:1克
THPO Others Human 人 Thrombopoietin / THPO / TPO CHO細胞裂解液 (陽性對照) 1,3-二羥基丁烷,英文名或英文縮寫:1,3-Butanediol,級別:生物技術級,97%,規(guī)格:5毫升
巨噬細胞生長添加物MGS6781-42-61,3-二乙?;?/span>1,3-DIACETYLBENZENE
IL13RA2 Others Rat 大鼠 IL13RA2 / IL13R 人細胞裂解液 (陽性對照) 四氫甲基嘧啶羧酸(>98%,BR)Ectoine質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
人視網(wǎng)膜muller細胞完全培養(yǎng)基 100mL氧化鎂碳酸鈉合劑Eschka's mixture質(zhì)量規(guī)格:BC
GH3細胞,大鼠埀體瘤細胞 5637(人細胞) 非洲綠猴腎細胞;Vero E6乙酯(>98%,BR)Ethyl dodeconoate質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
EFNA1 Protein Human 重組人 Ephrin-A1 / EFNA1 蛋白 (His & Fc 標簽)乙基曙紅(>95%,BS)Ethyl eosin質(zhì)量規(guī)格:>95%,BS
HCCLM3(人高轉移細胞) 5×106cells/瓶×2 肝竇內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)沒食子酸乙酯Ethyl gallate質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
同豬生殖與呼吸綜合癥病毒歐洲株PCR檢測試劑盒供應IL12A & IL12B Others Mouse 小鼠 IL12A & IL12B Heterodimer 人細胞裂解液 (陽性對照) 甲基倍他環(huán)糊精,2,6-二甲基-β-環(huán)糊精Me-β-CD質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
IMR-32 人神經(jīng)母細胞瘤細胞埃博霉素B;帕土匹龍Epothilone B(EPO906, Patupilone) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
CEM/C1人急性細胞細胞 CEM/C1 human acute lymphoblastic leukemia cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBSA 83-01;A83-01A8301質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
VEGFA Protein Mouse 重組小鼠 VEGFA / VEGF164 蛋白Amresco 進分瓊脂粉Agar質(zhì)量規(guī)格:BR,進分
小鼠垂體細胞(MPC)(5×105) 5637, 人細胞 Human氟伏沙明Fluvoxamine質(zhì)量規(guī)格:>98%,油狀
REG1B Others Human 人 REG1B / PSPS2 人細胞裂解液 (陽性對照) 溴百里酚藍鈉鹽25克
貓星形腦膠質(zhì)細胞;PG-4(S+L-)2,4-二叔丁基本酚,99%A 2,4-Di-tqrt-butylphqnol 96-76-4
CDCP1 Others Human 人 CDCP1 / CD318 人細胞裂解液 (陽性對照) 粘蛋白胭脂紅5KU
人平滑肌細胞完全培養(yǎng)基 100mL四本硼鉀100毫克保存:-20℃
A-431細胞,人表皮癌細胞 嗜血桿菌 BALB/C小鼠肝瘤株;BNL 1ME A.7R.11975-50-42-甲基-3-硝基本2-metxyl-3-nitnobenzoic acid