產地 | 進口、國產 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3950 |
用途 | 公司產品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
【產品名稱】: 跳躍病病毒PCR檢測試劑盒說明書
【英文名稱】: Louping Ill VirusRTPCR
【貨號】: BKP3950
【儲存條件及有效期】:
-20℃避光保存,避免反復凍融,有效期6個月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運輸】
u 樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
u 存放:樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應避免反復凍融(最多凍融3次);
u 運輸:采用冰壺或泡沫箱加冰密封進行運輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑,如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒,也可選擇其他合適的核酸提取產品。
組成及試劑配制:
酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
跳躍病病毒PCR檢測試劑盒說明書其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行,結合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產物的生成量是以指數方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,一般在2~4 小時完成擴增反應。擴增產物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術概論。
DDR2 Others Rat 大鼠 DDR2 Kinase / CD167b 人細胞裂解液 (陽性對照) 溴綠-甲基紅指示劑芬枕,英文名或英文縮寫:metxyl Red mixed indicator powder,級別:BR,95%,規(guī)格:100克
人肺大內皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL頭孢炳1(Z)-異構體 Cqfprozil (Z)-IsoMqr 1141-77-9
SK-MEL-1細胞,人皮膚色素瘤細胞 德氏乳桿菌乳酸亞種 人十二脂腸腺癌;HuTu-80GUANIDINExy7noCHLORIDE,LOWASH鹽酸胍技術級白色至微黃色顆粒結晶粉末RTsigma
ANGPTL7 Protein Canine 重組狗 ANGPTL7 / Angiopoietin-like 7 蛋白 (Fc 標簽)EDTA-2K乙二安四乙酸鉀25克高,73%
KG-1(人) 5×106cells/瓶×2 大鼠 PD-L1 / B7-H1 / CD274 人細胞裂解液 (陽性對照) 69610-40-8Boc-L-脯醇(S)-(-)-1-Boc-2-pyrrolidinemetxanol
IFNA1 Protein Rat 重組大鼠 IFN-alpha / IFNA1 / IFN 蛋白 (His 標簽)鹽酸奈福泮(標準品)Nefopam HCl質量規(guī)格:含量測定
LLC-WRC 256(大鼠腹水癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CHL/IU [ CHL-11 ](中國倉鼠肺細胞)甲睪酮; 甲基素(標準品)17-Methyltestosterone質量規(guī)格:含量測定
原代上皮細胞培養(yǎng)特制添加劑Many types of cells包裝:5/2.5/1ml布美他尼;丁苯氧酸(標準品)Bumetanide質量規(guī)格:含量測定
BTK Others Human 人 Bruton Tyrosine Kinase / BTK Kinase 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 氨甲環(huán)酸(標準品)Tranexamic acid質量規(guī)格:>98%,標準品
中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆);CHO-K1氨甲環(huán)酸Tranexamic acid質量規(guī)格:>98%,BR
EFNA4 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-A4 / EFNA4 蛋白 (His 標簽)多沙普侖Doxapram質量規(guī)格:美國進口
BGC-803(人細胞) 5×106cells/瓶×2 轉PYTL基因小鼠支持細胞;15P-1奧沙利鉑(標準品)Oxaliplatin質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品
人肝內膽管上皮細胞HIBEpiC硝酸奧昔康唑Oxiconazole Nitrate質量規(guī)格:度>99%
SIRPA Others Rat 大鼠 SIRP alpha / CD172a 人細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸土霉素Oxytetracycline HCl質量規(guī)格:>95%,BR
水牛皮膚成纖維樣細胞;WB-S2鹽酸土霉素(標準品)Oxytetracycline HCl質量規(guī)格:效價測定
跳躍病病毒PCR檢測試劑盒說明書PG細胞,人肺巨細胞癌 小鼠巨噬細胞,Ana-1細胞 CM-R119大鼠晶狀體上皮細胞完全培養(yǎng)基100mLR-羥基托吡酯質量規(guī)格:美國進口R-Hydroxy Topiramate
RWPE1(人上皮細胞) 5×106cells/瓶×2S-羥基托吡酯質量規(guī)格:美國進口S-Hydroxy Topiramate
Gibco E071000 MesenPRO RS? Medium 含2%血清(New Zealand origin) 1 kitD-鹽酸伐昔洛韋質量規(guī)格:美國進口D-Valacyclovir Hydrochloride
人雪旺細胞總RNAHSC NA伐昔洛韋雜質F質量規(guī)格:美國進口Valacyclovir Impurity F
小鼠小神經膠質細胞(MM)(5×105)4,5-二氟酞腈(>95.0%(GC))質量規(guī)格:>95.0%(GC)4,5-Difluorophthalonitrile
PCR檢測試劑盒
跳躍病病毒PCR檢測試劑盒說明書 (一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20oC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。