產地 | 進口、國產 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3953 |
用途 | 公司產品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
長須白蛉PCR檢測試劑盒直銷 | Lutzomyia longipalpisPCR | BKP3953 |
技術服務內容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:長須白蛉PCR檢測試劑盒直銷使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析,經過GenBank及自建龐大數據庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現性:該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證,重現性為100%。
3. 靈敏性:該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
NG108-15 大鼠小鼠雜合神經細胞Anisomycin回香霉素500U高,98%
COL2A1 Others Human 人 COL2A1 (aa 1242-1487) 人細胞裂解液 (陽性對照) 1,2,4-本三酚 99% 1,2,4-Bqnzqnqtriol 233-73-3
非洲綠猴腎細胞;VERO-76言醋米托醌 (HPLC) Mitoxcntronq 6271-80-9
Spike Others MERS-CoV 中東呼吸綜合征 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein fragme (aa 383-502) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) ABTSsubstrateliquid2,2′-聯-雙(3-乙基本并噻唑啉-6-磺酸)鹽底物25克AR,60%
胎兒真皮成纖維細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)145069-56-3Fmoc-鏈接劑4-[(2,4-Dimetxoxypxenyl)(Fmoc-amino)metxyl]pxenoxyacetic acid
IB3 Others Human 人 IB3 / B3 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸酪胺Tyramine hydrochloride質量規(guī)格:>97%,BR
EB病毒轉化的人B細胞;KMYM糠酸(>97%,BR)2-Furoic acid質量規(guī)格:>97%,BR
A3細胞,細胞細胞 5-8轉基因細胞系,F2-2細胞 CL-0330COLO 320DM(人結直腸腺癌細胞)5×106cells/瓶×22-甲基咪唑(>98%,BR)2-Methylimidazole質量規(guī)格:>98%,BR
中國倉鼠卵巢細胞系;CHO-TGF-beta-3/2000 Carrying Psv2-beta-TGF6-氯嘌呤(>98%,BR)6-Chloropurine質量規(guī)格:>98%,BR
LIFR Others Human 人 LIFR / CD118 人細胞裂解液 (陽性對照) Big CHAP(>98%,BR)Big CHAP質量規(guī)格:>98%,BR
長須白蛉PCR檢測試劑盒直銷CSF1R Others Human 人 CSF1R / MCSF Receptor / CD115 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸阿米洛利雜質(4-氨基-6-氯-1,3-苯基二硫酰胺)(標準品)4-amino-6-chloro-1,3-benzenedisulfonamide質量規(guī)格:供檢查用
CM-H102細胞完全培養(yǎng)基100mL氨基甲酰舍曲林葡萄糖苷酸Sertraline Carbamoyl Glucuronide質量規(guī)格:美國進口
HCT116, 人結細胞 ,AtT20細胞 COS-7(非洲青猴腎細胞)(1S,4R)鹽酸舍曲林(1S,4R) Sertraline Hydrochloride質量規(guī)格:美國進口
小鼠胚胎成纖維細胞;PA317氨基他達那非Amino Tadalafil質量規(guī)格:美國進口
CD86 Others Mouse 小鼠 CD86 / B7-2 人細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸特拉唑嗪Terazosin hydrochloride質量規(guī)格:美國進口
小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-B4 I型膠原酶(含10mL酶解緩沖液) 1mL1,4,8,11-四氮雜環(huán)十四烷-1,4,8,11-四乙酸四乙酯(>97.0%(GC))質量規(guī)格:>97.0%(GC)Tetraethyl 1,4,8,11-Tetraazacyclotetradecane-1,4,8,11-tetraacetate
Raji,人Butt's瘤細胞 Human1,4,7,10-四氮雜環(huán)十二烷-1,4,7-三乙酸三叔丁酯(>93.0%(N))質量規(guī)格:>93.0%(N)Tri-tert-butyl 1,4,7,10-Tetraazacyclododecane-1,4,7-triacetate
FAS Others Human 人 CD95 / Fas / TNFRSF6 人細胞裂解液 (陽性對照) 1,4,7,10-四氮雜環(huán)十二烷-1,4,7,10-四乙酸三叔丁酯(>97.0%(T))質量規(guī)格:>97.0%(T)Tri-tert-butyl 1,4,7,10-Tetraazacyclododecane-1,4,7,10-tetraacetate
人胎盤絨膜癌細胞;BeWo4-叔丁基杯[8]芳烴(>98.0%(HPLC))質量規(guī)格:>98.0%(HPLC)4-tert-Butylcalix[8]arene
CLEC5A Others Cynomolgus 食蟹猴 CLEC5A / MDL1 / MDL-1 人細胞裂解液 (陽性對照) 1,4,5,6-四氫-5,6-二氧-2,3-吡嗪二甲腈(>98.0%(HPLC)(T))質量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T)1,4,5,6-Tetrahydro-5,6-dioxo-2,3-pyrazinedicarbonitrile
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。