產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3964 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
梅恩君病毒PCR檢測試劑盒價格 | Main Drain Virus(MDV)RTPCR | BKP3964 |
技術服務內容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:梅恩君病毒PCR檢測試劑盒價格使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
大鼠細胞;IR983F100克
CEACAM5 Others Human 人 CEACAM5 / CD66e 人細胞裂解液 (陽性對照) DL-蘇酸 DL-Theronine,≥90% 80-68-2 25G 通用試劑
間充質干細胞培養(yǎng)基MSCM-prf異炳基環(huán);六輕異炳本;六輕枯1;2-環(huán)己基炳烷 Isopropylcyclohqxcnq;Hqxcxy7nocuMqnq;2-Cyclohqxylpropcnq 696-9-7
CD33 Others Human 人 CD33 / Siglec-3 人細胞裂解液 (陽性對照) 本二酸氫鈉,英文名或英文縮寫:wo7ium xy7nogen phthalate,級別:AR,規(guī)格:5克
EB病毒轉化的人B細胞;KMYM556-50-3甘酰甘酸;甘勝;雙甘肽;一縮二基乙酸Glycylglycine;Diglycine
HFE2 Others Human 人 Hemojuvelin / HFE2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (分析標準品,>99.5%(GC))Lauric acid質量規(guī)格:分析標準品,>99.5%(GC)
CL-0153MDBK(牛腎細胞)5×106cells/瓶×2神經(jīng)酸(分析標準品,≥99.0%(GC))Nervonic acid質量規(guī)格:分析標準品,≥99.0%(GC)
MGC80-3(MGC-803)人細胞 細胞,Coc2細胞 HEC-1-B(子宮內膜腺癌細胞)十五烷酸(分析標準品,≥99.5%(GC))Pentadecanoic Acid質量規(guī)格:分析標準品,≥99.5%(GC)
人非小細胞;NCI-H1975泛酸鈣一水合物(標準品)(+)-Pantothenic acid calcium salt hydrate質量規(guī)格:分析標準品
HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/Anhui/1/2005) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) 山梨酸鉀(標準品)Potassium sorbate質量規(guī)格:分析標準品
梅恩君病毒PCR檢測試劑盒價格AMY2A Others Human 人 AMY2A / Alpha-amylase 人細胞裂解液 (陽性對照) 膽戊基碳酸酯Cholesterol Amyl Carbonate質量規(guī)格:
人肝動脈內皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL膽正辛基碳酸酯Cholesterol n-Octyl Carbonate質量規(guī)格:
NFS-60細胞,小鼠細胞G-CSF依賴性 HeLa [ Chang Liver ](張氏肝細胞) 非洲綠猴腎細胞;BS-C-1膽己基碳酸酯Cholesterol Hexyl Carbonate質量規(guī)格:
XCL2 Protein Human 重組人 XCL2 蛋白 (His 標簽)4-(4-乙氧苯氧羰基)苯基碳酸戊酯(>95.0%(HPLC))Amyl 4-(4-Ethoxyphenoxycarbonyl)phenyl Carbonate質量規(guī)格:>95.0%(HPLC)
PK-15(豬腎細胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 / 恒河猴 CCN3 / NOV Baculovirus-Insect cells ansfected Lysate (positive corol) (denatured)碳酸丁基4-羧苯酯(>98.0%(T))Butyl 4-Carboxyphenyl Carbonate質量規(guī)格:>98.0%(T)
HUVEC細胞,人臍內皮細胞 人肝細胞正常,HL-7702細胞 CL-0072Daudi(人瘤細胞)5×106cells/瓶×2光甘草定質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品Glabridin
人APP-PS1雙基因轉染CHO細胞株;7WPS1鬼臼(標準品)質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品Podophyllotoxin
TFPI Others Human 人 TFPI 人細胞裂解液 (陽性對照) 鬼臼(95%)質量規(guī)格:HPLC>95%,BRPodophyllotoxin
腎實質細胞Many types of cells包裝:5 ×105方(1ml)鬼臼(85%)質量規(guī)格:>85%,BRPodophyllotoxin
TPM4 Others Human 人 TPM4 / opomyosin 4 人細胞裂解液 (陽性對照) β-淀粉樣蛋白(25-35)質量規(guī)格:>95%,BRβ-Amyloid (25-35)
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。