產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3976 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
折光馬爾太蟲PCR檢測試劑盒價格 | Marteilia refringensPCR | BKP3976 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:折光馬爾太蟲PCR檢測試劑盒價格使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
tTA基因修飾的小鼠(B類);F9-CAG-tTA-1A3酚酞單嶙酸二環(huán)己鹽,英文名或英文縮寫:pxenolphthalein monophosphate bis(cyclohexylammonium) salt,級別:試劑級,95%,規(guī)格:500毫克
TNFSF8 Others Rat 大鼠 CD153 / CD30L / TNFSF8 人細胞裂解液 (陽性對照) 鄰基隊本二酚 2-Mqthylxy7noinoneonq 92-71-6
膀胱平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)嗜熱菌蛋白酶,英文名或英文縮寫:Thermolysin from Bacillus thermoproteolyticus rokko,級別:生物技術(shù)級,30u/mg,規(guī)格:25克
EC-304細胞,人內(nèi)皮細胞 小鼠細胞,Kert-3細胞 人脈絡(luò)叢上皮細胞總RNAHCPEpiC NA對羥基,英文名或英文縮寫:PHBA,級別:BR,99%,分子量600,液體,規(guī)格:5克
QG-56(人肺扁平上皮癌細胞) 5×106cells/瓶×281-30-11,4,5,8-四二酐1,4,5,8-tetracarboxylic dianhydride
HCT 116細胞,細胞 人細胞,Bel-7404細胞 CL-0016A549(人非小細胞細胞)5×106cells/瓶×2外消旋5-羧基托特羅定rac 5-Carboxy Tolterodine質(zhì)量規(guī)格:美國進口
二氫葉酸還原酶缺陷型中國倉鼠卵巢細胞;CHO/dhFr-R-(+)-托特羅定R-(+)-Tolterodine質(zhì)量規(guī)格:美國進口
CSF1R Others Human 人 M-CSFR 人細胞裂解液 (陽性對照) (R)-5-羥甲基托特羅定(R)-5-Hydroxymethyl Tolterodine質(zhì)量規(guī)格:美國進口
小梁網(wǎng)細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)托吡酯-d12Topiramate-d12質(zhì)量規(guī)格:美國進口
MZB1 Others Human 人 MZB1 / PERP1 人細胞裂解液 (陽性對照) 2,3-去亞異丙基托吡酯2,3-Desisopropylidene Topiramate質(zhì)量規(guī)格:美國進口
折光馬爾太蟲PCR檢測試劑盒價格豹貓肺成纖維樣細胞;LCL3BOC-D-絲氨酸甲酯BOC-D-Serine methyl ester質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
CNE1, 人細胞系BOC 精氨酸Boc-Arg(Pbf)-OH質(zhì)量規(guī)格:0.98
人纖維細胞;HT-1080 大鼠腸平滑肌細胞完全培養(yǎng)基 100mLBMS-345541BMS345541質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
腦內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)IKK-16,選擇性IKK抑制劑IKK16質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
PDGFRB Others Cynomolgus 食蟹猴 PDGFRB / PDGFR-1 人細胞裂解液 (陽性對照) 曲格列汀琥珀酸鹽 Trelagliptin succinate;SYR-472質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
CEACAM5 Others Human 人 CEACAM5 / CD66e 人細胞裂解液 (陽性對照) 2,2'-雙(羥甲基)二苯(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)2,2'-Bis(hydroxymethyl)diphenyl Ether
人外根殼細胞RNAHHORSC miRNA5 μg雙(2-甲酰苯基)(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)Bis(2-formylphenyl) Ether
CFHR2 Others Human 人 CFHR2 / FHR2 / HFL3 人細胞裂解液 (陽性對照) 1,3-雙(4-氨苯氧基)苯(>98.0%(GC)(T))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T)1,3-Bis(4-aminophenoxy)benzene
人臍平滑肌細胞完全培養(yǎng)基 100mL4-氨基-4'-氯二苯(>97.0%(GC)(T))質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC)(T)4-Amino-4'-chlorodiphenyl Ether
BRL大鼠Buffalo細胞,大鼠肝細胞 SH-SY5Y(神經(jīng)母細胞瘤細胞) 人肺粘液上皮樣癌細胞;NCI-H2921,4,8,12-四氮雜環(huán)十五烷(>97.0%(T))質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(T)1,4,8,12-Tetraazacyclopentadecane
反應五要素:
參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。