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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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改良安卡拉痘苗病毒PCR檢測試劑盒說明書
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
  • 貨號:BKP3998
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-13
  • 更新日期: 2024-11-25
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進口、國產(chǎn)
品牌 帛科
貨號 BKP3998
用途 公司產(chǎn)品僅用物科研
包裝規(guī)格 50次
純度 %
CAS編號
是否進口

改良安卡拉痘苗病毒PCR檢測試劑盒說明書【儲存條件及有效期】:
-20
避光保存,避免反復凍融,有效期6個月。
【適用儀器】:
ABI7300
、ABI7500LightCycler 480、iCycleriQ5CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運輸】
u
樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
u
存放:樣本在2~8條件下保存應(yīng)不超過72h-70以下可長期保存,但應(yīng)避免反復凍融(最多凍融3次);
u
運輸:采用冰壺或泡沫箱加冰密封進行運輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑,如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒,也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。

【產(chǎn)品名稱】: 改良安卡拉痘苗病毒PCR檢測試劑盒說明書
【英文名稱】: Modified Vaccinia Virus Ankara (MVA)PCR
【貨號】: BKP3998
組成及試劑配制:

酶標板:一塊(96孔)
2
、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml 200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3
、 樣品稀釋液:1×20ml。
4
、 檢測稀釋液A1×10ml
5
、 檢測稀釋液B1×10ml。

改良安卡拉痘苗病毒PCR檢測試劑盒說明書其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復性)可以在較高的溫度下進行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2)
靈敏度高
PCR
產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3RFU(空斑形成單位);在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3)
簡便、快速
PCR
反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在24 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4)
對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。

EFNA1 Protein Human 重組人 Ephrin-A1 / EFNA1 蛋白 (His 標簽)(S)-2--3-(4-咪唑基),英文名或英文縮寫:L-Histidine,級別:BR,99%,規(guī)格:10

EJ(人細胞) 5×106cells/瓶×2 肺大平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105(1ml)-2,4-二硝基... -2,4-DNPH 888-54-0 1ML 標準品

間充質(zhì)干細胞脂肪細胞分化培養(yǎng)基MADM-prf二茂鐵;環(huán)務(wù)二1 Fqrrocqnq;Biscyclopqntcdiqnyl iron;Di-2,4-cyclopqntcdiqn-1-yl iron 10-24-2

CDCP1 Others Mouse 小鼠 CDCP1 人細胞裂解液 (陽性對照) 4,4'-Bipyridineγ,γ-聯(lián)1AR99%

大鼠完全培養(yǎng)基 100mL10034-82-9wo7ium chromate tetrahydrate
GBP1 Others Human
GBP1 人細胞裂解液 (陽性對照) 增甘1(>97.0%(T))Glycine-N,N-bis(methylenephosphonic Acid)質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(T)

木瓜蛋白酶(10mL酶解緩沖液) 1mLN-甲基亞氨二乙酸(>98.0%(GC)(T))N-Methyliminodiacetic Acid質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T)

PC9-EGFP-puro(慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)人細胞 PC9-EGFP-puro (leiviral consuct stable sain) in human lung cancer cells DMEM+10%FBS+1%P/S+2ug/ml puromycin氮基三乙酸二鈉鹽(>99.0%(T))Nitrilotriacetic Acid Di Salt質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(T)

IL32 Protein Human 重組人 Ierleukin-32 / IL-32 蛋白 (isoform alpha, His 標簽)N-(2-羧乙基)亞氨基二乙酸(>98.0%(T))N-(2-Carboxyethyl)iminodiacetic Acid質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)

人平滑肌細胞(HCSMC)(5×105 ) RLF, 大鼠成纖維細胞 Rattus三乙四胺-N,N,N',N'',N''',N'''-六乙酸(>98.0%(T))Triethylenetetramine-N,N,N',N'',N''',N'''-hexaacetic Acid質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)
SELE Others Rat
大鼠 E-Selectin / CD62e / SELE 人細胞裂解液 (陽性對照) 蛋白酶K(進分)Proteinase K質(zhì)量規(guī)格:≥30units/mg protein,sigma分裝

CM-H025人胰腺上皮細胞完全培養(yǎng)基100mL蛋白酶K(Sigma)Proteinase K質(zhì)量規(guī)格:≥30units/mg protein,sigma原裝

HuTu-80細胞,人十二指腸腺癌細胞 人色素瘤細胞,HME2細胞 人肝永生化細胞;THLE-3胰凝乳蛋白酶抑制劑Chymostatin質(zhì)量規(guī)格:進分

H9c2(2-1) (大鼠心肌細胞) 5×106cells/瓶×2亮抑蛋白酶肽(進口)Leupeptin 質(zhì)量規(guī)格:≥95%,進口半硫酸鹽

CD80 Others Human B7-1 / CD80 人細胞裂解液 (陽性對照) 胃酶抑素A;抑肽素;胃蛋白酶抑制劑Pepstatin A microbial質(zhì)量規(guī)格:≥90%,進分
改良安卡拉痘苗病毒PCR檢測試劑盒說明書人平滑肌細胞裂解物HCSMCL肌酸,英文名或英文縮寫:Creatine Monohydrate,級別:BR,99%,規(guī)格:25

AMTN Others Human AMTN / Amelotin 人細胞裂解液 (陽性對照) 1.2- 1,2-BUTcNqDIOL 284-03-

小鼠胚胎成纖維細胞;3T3-Swiss albino三氧化鉬 Molybdqnum trioxidq 1313-7-2

tTA基因修飾的小鼠(B);P19-CAG-tTA-1F3 彈性蛋白酶(10mL酶解緩沖液) 1mL5-嶙酸吡哆醛,英文名或英文縮寫:PLP,級別:IND,規(guī)格:5

A549, 人細胞系 HumanEC肉湯EC BROTH FOR MICROBIOLOGY

PCR檢測試劑盒

 ()RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)
Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)
移入1.5mlEP管中,4oC 13000g離心10min
(3)
上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min
(4)
加入0.2ml氯仿/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4oC 12000g
離心15min。
(6)
仔細吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)
加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4oC 12000g
離心10minEP管底部可見白色沉淀物。
(9)
棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g
離心5min
(11)
吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)
半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20oC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)
所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0
(14)
取所提取的總RNA1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s18s兩條rRNA
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。


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