產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3998 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
改良安卡拉痘苗病毒PCR檢測試劑盒說明書【儲存條件及有效期】:
-20℃避光保存,避免反復凍融,有效期6個月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運輸】
u 樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
u 存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應(yīng)避免反復凍融(最多凍融3次);
u 運輸:采用冰壺或泡沫箱加冰密封進行運輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑,如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒,也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。
【產(chǎn)品名稱】: 改良安卡拉痘苗病毒PCR檢測試劑盒說明書
【英文名稱】: Modified Vaccinia Virus Ankara (MVA)PCR
【貨號】: BKP3998
組成及試劑配制:
酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
改良安卡拉痘苗病毒PCR檢測試劑盒說明書其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復性)可以在較高的溫度下進行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。
EFNA1 Protein Human 重組人 Ephrin-A1 / EFNA1 蛋白 (His 標簽)(S)-2-基-3-(4-咪唑基),英文名或英文縮寫:L-Histidine,級別:BR,99%,規(guī)格:10克
EJ(人細胞) 5×106cells/瓶×2 肺大平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)-2,4-二硝基... -2,4-DNPH 888-54-0 1ML 標準品
間充質(zhì)干細胞脂肪細胞分化培養(yǎng)基MADM-prf二茂鐵;環(huán)務(wù)二1鐵 Fqrrocqnq;Biscyclopqntcdiqnyl iron;Di-2,4-cyclopqntcdiqn-1-yl iron 10-24-2
CDCP1 Others Mouse 小鼠 CDCP1 人細胞裂解液 (陽性對照) 4,4'-Bipyridineγ,γ-聯(lián)1克AR,99%
大鼠完全培養(yǎng)基 100mL10034-82-9wo7ium chromate tetrahydrate
GBP1 Others Human 人 GBP1 人細胞裂解液 (陽性對照) 增甘1(>97.0%(T))Glycine-N,N-bis(methylenephosphonic Acid)質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(T)
木瓜蛋白酶(含10mL酶解緩沖液) 1mLN-甲基亞氨二乙酸(>98.0%(GC)(T))N-Methyliminodiacetic Acid質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T)
PC9-EGFP-puro(慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)人細胞 PC9-EGFP-puro (leiviral consuct stable sain) in human lung cancer cells DMEM+10%FBS+1%P/S+2ug/ml puromycin氮基三乙酸二鈉鹽(>99.0%(T))Nitrilotriacetic Acid Di Salt質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(T)
IL32 Protein Human 重組人 Ierleukin-32 / IL-32 蛋白 (isoform alpha, His 標簽)N-(2-羧乙基)亞氨基二乙酸(>98.0%(T))N-(2-Carboxyethyl)iminodiacetic Acid質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)
人平滑肌細胞(HCSMC)(5×105 ) RLF, 大鼠成纖維細胞 Rattus三乙四胺-N,N,N',N'',N''',N'''-六乙酸(>98.0%(T))Triethylenetetramine-N,N,N',N'',N''',N'''-hexaacetic Acid質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)
SELE Others Rat 大鼠 E-Selectin / CD62e / SELE 人細胞裂解液 (陽性對照) 蛋白酶K(進分)Proteinase K質(zhì)量規(guī)格:≥30units/mg protein,sigma分裝
CM-H025人胰腺上皮細胞完全培養(yǎng)基100mL蛋白酶K(Sigma)Proteinase K質(zhì)量規(guī)格:≥30units/mg protein,sigma原裝
HuTu-80細胞,人十二指腸腺癌細胞 人色素瘤細胞,HME2細胞 人肝永生化細胞;THLE-3胰凝乳蛋白酶抑制劑Chymostatin質(zhì)量規(guī)格:進分
H9c2(2-1) (大鼠心肌細胞) 5×106cells/瓶×2亮抑蛋白酶肽(進口)Leupeptin 質(zhì)量規(guī)格:≥95%,進口半硫酸鹽
CD80 Others Human 人 B7-1 / CD80 人細胞裂解液 (陽性對照) 胃酶抑素A;抑肽素;胃蛋白酶抑制劑Pepstatin A microbial質(zhì)量規(guī)格:≥90%,進分
改良安卡拉痘苗病毒PCR檢測試劑盒說明書人平滑肌細胞裂解物HCSMCL肌酸,英文名或英文縮寫:Creatine Monohydrate,級別:BR,99%,規(guī)格:25克
AMTN Others Human 人 AMTN / Amelotin 人細胞裂解液 (陽性對照) 1.2- 1,2-BUTcNqDIOL 284-03-
小鼠胚胎成纖維細胞;3T3-Swiss albino三氧化鉬 Molybdqnum trioxidq 1313-7-2
tTA基因修飾的小鼠(B類);P19-CAG-tTA-1F3 彈性蛋白酶(含10mL酶解緩沖液) 1mL5-嶙酸吡哆醛,英文名或英文縮寫:PLP,級別:IND,規(guī)格:5克
A549, 人細胞系 HumanEC肉湯EC BROTH FOR MICROBIOLOGY
PCR檢測試劑盒
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20oC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。