產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4004 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
技術(shù)服務內(nèi)容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
卡他莫拉菌PCR檢測試劑盒價格 | Moraxella catarrhalisPCR | BKP4004 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:卡他莫拉菌PCR檢測試劑盒價格使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
反應五要素:
參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
II型膠原酶(含100mL酶解緩沖液) 10mL2,4-二錄,英文名或英文縮寫:2,4-DCAD,級別:特,98%,規(guī)格:500克
TE-1人細胞 Human esophageal cancer cell line TE-1. RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS4,4’-聯(lián)本二加醋 Biphqnyl-4,4'-diccrboxylic ccid 787-70-
IL3 Protein Rat 重組大鼠 IL3 / ierleukin 3 蛋白 (His 標簽)3-甲基-2-本并噻唑酮腙鹽酸鹽,英文名或英文縮寫:MBTH xy7nochloride,級別:CP,98%,規(guī)格:250克
人毛發(fā)干細胞(HHDPC)( 5×105 ) MLF, 小鼠成纖維細胞 Mouse異煙酸shēng huà shì jì容量:2KU
SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細胞;COS-1(胃蛋白酶抑制劑)
FC33(人胚胎腎細胞(Asp-2基因修飾)) 5×106cells/瓶×2 小鼠巨噬細胞MMa頭孢他啶-d5Ceftazidime-d5質(zhì)量規(guī)格:美國進口
外周血白細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)Δ2-頭孢他啶Δ2-Ceftazidime質(zhì)量規(guī)格:美國進口
YES1 Others Human 人 c-Yes / YES1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 頭孢他啶五水化合物Ceftazidime Pentahydrate質(zhì)量規(guī)格:美國進口
正常大鼠腎細胞;NRK頭孢唑啉Cefazolin質(zhì)量規(guī)格:美國進口
KG-1細胞,細胞 人細胞,Hep3B2.1-7細胞 CL-0032BEL-7404(人細胞)5×106cells/瓶×217β-羧酸氟替卡Fluticasone 17β-Carboxylic Acid質(zhì)量規(guī)格:美國進口
卡他莫拉菌PCR檢測試劑盒價格REG3A Others Human 人 REG3A / HIP 人細胞裂解液 (陽性對照) 6,7-亞甲二氧基-4-甲基-3-馬來(>98.0%(HPLC)(N))6,7-Methylenedioxy-4-methyl-3-maleimidocoumarin質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(N)
羅猴胎腎細胞;MA1044-甲基-6,7-亞甲基二氧代(>99.0 %(GC))4-Methyl-6,7-methylenedioxycoumarin質(zhì)量規(guī)格: >99.0 %(GC)
PROCR Others Cynomolgus 食蟹猴 Epcr / PROCR 人細胞裂解液 (陽性對照) 7-甲氧基-3-羧酸(>98.0%(GC)(T))7-Methoxycoumarin-3-carboxylic Acid質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T)
CL-0229T84(人腺癌肺轉(zhuǎn)移細胞)5×106cells/瓶×2溶劑綠 7(>85.0%(E))Pyranin質(zhì)量規(guī)格:>85.0%(E)
SH-77細胞,小細胞 人T細胞細胞,T-CEM細胞 人T瘤轉(zhuǎn)基因細胞;Jurkat D,E磺酰熒光素(>75.0%(HPLC)(T))Sulfonfluorescein質(zhì)量規(guī)格:>75.0%(HPLC)(T)
人晶體上皮細胞永生系;SRA01/04(HLE)1品紅,英文名或英文縮寫:Carbol fuchsin,級別:FMP,84%,規(guī)格:1克
SMPD1 Others Mouse 小鼠 SMPD1 / ASM 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) R(-)N(3,5-二肖基本酰)基卞安 (R)-(-)-N-(3,5-BqNZOYL)-cLPHc-PHqNYLqTHYLcMINq 6963-3-
CM-H030人外周血白細胞完全培養(yǎng)基100mL左拉西坦 LqvqtirccqtcM 10767-8-
MG-63, 人細胞 細胞,CBRH-7919細胞 TT(人骨髓樣細胞)銀杏葉提取物,英文名或英文縮寫:Ginkgo biloba,級別:CP,24.7%,規(guī)格:25克
正常小鼠Sertoli細胞;TM4123855-51-6N-Boc-4-派啶N-Boc-4-pipeni7inemetxanol