產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP4138 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過(guò)與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
脫氮副球菌PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書 | Paracoccus denitrificansPCR | BKP4138 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
2-(Phenylmethoxy)-naphthalene 613-62-7 中文名:2-萘酚芐基醚 分子式:C17H14O 度:98.0% 小鼠核因子κB受體活化因子配基elisa試劑盒 小鼠核因子κB受體活化因子配基試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠核因子κB受體活化因子配基試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠核因子κB受體活化因子配基試劑盒、小鼠核因子κB受體活化因子配基eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
2-(Morpholinodithio)benzothiazole 95-32-9 中文名:2-(4-嗎啉基二硫代)苯并噻唑 分子式:C11H12N2OS3 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠過(guò)氧化物酶體增殖因子活化受體elisa試劑盒 小鼠過(guò)氧化物酶體增殖因子活化受體試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠過(guò)氧化物酶體增殖因子活化受體試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠過(guò)氧化物酶體增殖因子活化受體試劑盒、小鼠過(guò)氧化物酶體增殖因子活化受體eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
2-(Chloromethyl)-4-methylquinazoline 109113-72-6 中文名: 分子式:C10H9ClN2 度:98.0% 小鼠過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體elisa試劑盒 小鼠過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體試劑盒、小鼠過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
2-(7-Methoxy-1-naphthyl)ethylamine 139525-77-2 中文名: 分子式:C13H16ClNO 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠甲種胎兒球蛋白elisa試劑盒 小鼠甲種胎兒球蛋白試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠甲種胎兒球蛋白試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠甲種胎兒球蛋白試劑盒、小鼠甲種胎兒球蛋白eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
2-(5-Chloro-2-phenoxyphenyl)acetic acid 70958-20-2 中文名: 分子式:C14H11ClO3 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠核因子kb(NF-kb)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
rabbitadrencocoicoopichormone,ACTHELISAKit 兔子促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝 2,6-Dimethoxy-1-acetonylquinol 2215-96-5 中文名: 分子式:C11H14O5 度:% 關(guān)鍵詞: 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)
Rabbitadramycin,ADRELISAKit兔阿霉素(ADR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 2,4-Dihydroxy-3-nitropyridine 89282-12-2 中文名: 分子式:C5H4N2O4
QSPlasmidMaxiKit 10T Tranexamic acid 中文名:凝血酸 分子式:C8H15NO2
PlasmidMidiKit 100T trans-4-Aminocyclohexanol 27489-62-9 中文名: 分子式:C6H13NO
PlasmidMaxiKit 10T trans-4-Aminocyclohexanol 中文名: 分子式:C6H13NO
脫氮副球菌PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書狗腎惡性癥細(xì)胞;DH827-(二乙基氨基)-3-羧酸(>98.0%(GC)(T))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T)7-(Diethylamino)coumarin-3-carboxylic Acid
THPO Others Human 人 Thrombopoietin / THPO / TPO / TPO 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 6-[4-(二苯基氨基)苯基]-3-羧酸乙酯(>98.0%(HPLC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)Ethyl 6-[4-(Diphenylamino)phenyl]coumarin-3-carboxylate
CL-0215SK-OV-3(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×2熒光素二鉀質(zhì)量規(guī)格:熒光染料Uranine K
APOM Others Human 人 APOM 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 熒光素二乙酸酯(>98.0%(HPLC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)Fluorescein Diacetate
小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL6-羧基四甲基羅丹明;6-TAMRA質(zhì)量規(guī)格:≥90%;for fluorescence6-Carboxytetramethylrhodamine
ECE1 Others Human 人 ECE1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 血清兔抗人IgGshēng huà shì jì容量:250克
人腎上腺皮質(zhì)腺癌細(xì)胞;NCI-H295R啊利新藍(lán)8GS cLCIcN BLUq 8GX 1633-92-3
EFNB3 Others Rat 大鼠 Ephrin-B3 / EFNB3 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 3-環(huán)己基炳醋 Cyclohqxcnqpropionic ccid 701-97-3
人直平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL1shēng huà shì jì容量:RT10克
L1210細(xì)胞,小鼠細(xì)胞 多形擬桿菌 大額牛腎細(xì)胞;BFR-K1(1酸肌酸鈉)
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:脫氮副球菌PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過(guò)GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。