產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4156 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
戊糖片球菌PCR檢測試劑盒價格 | Pediococcus pentosaceusPCR | BKP4156 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應(yīng)嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
22-Dehydroclerosteryl acetate 中文名: 分子式:C31H48O2 度:93.0% 兔環(huán)氧化酶-1(rabbit COX-1) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝
Pregnenolone 中文名:孕烯醇酮 分子式:C21H32O2 度:98.5% 兔核因子κ B 英文名稱: Rabbit Nuclear factor κB 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: NFkB
Chlorotetracycline 57-62-5 中文名:金霉素 分子式:C22H23ClN2O8 兔骨保護素<破骨細胞抑制因子> 英文名稱: Rabbit Osteoprotegerin 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: OPG
Levodopa 59-92-7 中文名:左旋多巴 分子式:C9H11NO4 兔血小板活化因子 英文名稱: Rabbit Platelet Activating Factor 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: PAF
Nevirapine 129618-40-2 中文名:奈偉拉平 分子式:C15H14N4O 兔蛋白激酶A 英文名稱: Rabbit Protein Kinase A 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: PKA
Wright's-GiemsaStainingSolion 3-Amino-3-phenyl-1-propanol 14593-04-5 中文名:3-氨基-3-苯基-1-丙醇 分子式:C9H13NO
Umbelliferone 25g 4-Aminobenzophenone 中文名:4-氨基二苯甲酮 分子式:C13H11NO
Tween80 250ml 4-Aminobutyric acid 1956/12/2 中文名:4-氨基丁酸 分子式:C4H9NO2
TMB 1g 4-(Phenylthio)benzyl alcohol 中文名: 分子式:C13H12OS
TMA 500g 4,4'-Bis(2-benzoxazolyl)stilbene 1533-45-5 中文名:4,4'-雙(2-苯并惡唑基)芪 分子式:C28H18N2O2
戊糖片球菌PCR檢測試劑盒價格大鼠牙細胞完全培養(yǎng)基 100mL子囊霉素質(zhì)量規(guī)格:>97%,BRAscomycin,FK520
PIEC豬髖動脈內(nèi)皮細胞 PIEC pig iliac artery endothelial cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS子囊霉素(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標準品Ascomycin,FK520
IL36G Protein Human 重組人 IL36G / IL1F9 蛋白 (aa 18-169, His 標簽)阿扎那韋質(zhì)量規(guī)格:≥99.0%Atazanavir
NCTC 1469(小鼠正常肝細胞) 5×106cells/瓶×2 HCT 116(細胞)阿卡波糖質(zhì)量規(guī)格:>97%,細胞培養(yǎng)級Acarbose
CL-0408NEC(人細胞)5×106cells/瓶×2阿卡波糖(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>95%,標準品Acarbose
CL-0337FO(小鼠細胞)5×106cells/瓶×24-對乙酰氨基酚硫酸鹽-d3質(zhì)量規(guī)格:美國進口4-Acetaminophen-d3 Sulfate
RN-h, 大鼠海馬趾神經(jīng)元3-(N-乙酰-L-半胱氨酸-S-基)對乙酰氨基酚鈉鹽質(zhì)量規(guī)格:美國進口3-(N-Acetyl-L-cystein-S-yl) Acetaminophen Salt
人皮膚成纖維細胞;HSAS4 人胎盤絨毛膜細胞完全培養(yǎng)基 100mL2-十八1酸單甘油酯質(zhì)量規(guī)格:美國進口2-Oleoylglycerol
人牙周膜成纖維細胞RNAHPLR miRNA5 μg1-月桂酰-3-氯質(zhì)量規(guī)格:美國進口1-Lauroyl-3-chloropropanediol
AK2 Others Human 人 AK2 / Adenylate kinase 2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 4-丁基苯(>95.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)4-Butylbenzaldehyde
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:戊糖片球菌PCR檢測試劑盒價格使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。