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| 產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號 | BKP4001 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50次 |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μ進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
莫佩亞病毒PCR檢測試劑盒直銷 | Mopeia Virus(MOPV)RTPCR | BKP4001 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：
實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達量。
特點優(yōu)勢：
1. 特異性：莫佩亞病毒PCR檢測試劑盒直銷使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證，重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性：該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌，可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
SK-NEP-1(人腎母細胞瘤細胞) 5×106cells/瓶×2糖化酶10克RT
Hela(人細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0426RKO-E6(人轉(zhuǎn)基因細胞)5×106cells/瓶×2 人胚;MRC-5雙酚芴 9,9-Bis(4-xy7noxyphqnyl)fluorqnq 336-71-3
TNFa轉(zhuǎn)染耐VP16絨癌細胞;JEG-3-VP16-TNFaMEGA-9MEGA-9超級5G85261-19-4RT
CD79B Others Mouse 小鼠 CD79B / B29 人細胞裂解液 (陽性對照) 100bpDNALadderⅡ100克
MKN-45 低分化(-N，N-雙(2-乙磺酸))
FCGR1 Others Rat 大鼠 CD64 / FCGR1A 人細胞裂解液 (陽性對照) 司班80;司盤80Span* 80質(zhì)量規(guī)格：BR
NIH?3T3? 小鼠成纖維細胞聚乙二醇1000PEG 1000質(zhì)量規(guī)格：分子量1000
非洲綠猴腎細胞;BS-C-1胰蛋白胨(BD)Tryptone質(zhì)量規(guī)格：BD 211705
Hela, 人細胞系丹磺酰氯DNSCl, Dansyl chloride質(zhì)量規(guī)格：>98%
人小細胞細胞;NCI-H209 大鼠肺大內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基 100mLN-乙基順丁1二N-Ethylmaleimide質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
莫佩亞病毒PCR檢測試劑盒直銷IB2 Others Human 人 IB2 / B2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 西洛多辛(標準品)Silodosin質(zhì)量規(guī)格：>98.5%，標準品
小鼠成肌細胞;C2C121酸溴莫尼定Brimonidine tartrate 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR
Lec1細胞，卵巢細胞 人細胞,FL62891細胞 CL-0152MDA-MB-453(人癌細胞)5×106cells/瓶×2Bacto酵母浸粉(BD原裝)Yeast extract質(zhì)量規(guī)格：Bacto;BD212750
中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆);CHO-K1無水碳酸鈉 carbonate anhydrous質(zhì)量規(guī)格：AR,≥99.8%
POSTN Others Human 人 OSF2 / POSTN 人細胞裂解液 (陽性對照) D-果糖D-Fructose質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR
Calu-6(人肺退行性癌細胞) 5×106cells/瓶×2 人微內(nèi)皮細胞HPrMEC鄰磺酰酞鈉鹽，英文名或英文縮寫：Cresol Red wo7ium salt，級別：生物技術(shù)級，98%，規(guī)格：250毫克
人腦微內(nèi)皮細胞cDNAHBMEC cDNAS-Alpine-硼完 B-ISOPINOCcMPHqYL-9-BORcBICYCLO[3.3.1]NONcNq 4371-63-1
IL23 Others Human 人 IL-23A & IL-12B Heterodimer 人細胞裂解液 (陽性對照) OED60K型發(fā)酵工業(yè)通用消泡劑，英文名或英文縮寫：Antifoam OED60K，級別：超，98%，規(guī)格：1克
B95-8 絨猴EBV轉(zhuǎn)化的白細胞3,4-乙撐二氧，英文名或英文縮寫：EDOT，級別：2N，99%，規(guī)格：10克
CL-0190RAW 264.7(小鼠單核巨噬細胞細胞)5×106cells/瓶×2OPD 5g/10g/50g/250g原裝 Amresco 0688
反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個堿基，應(yīng)嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。
