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上海帛科生物技術有限公司
   
     
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牛莫拉氏菌PCR檢測試劑盒說明書
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
  • 貨號:BKP4002
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-13
  • 更新日期: 2024-11-25
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進口、國產(chǎn)
品牌 帛科
貨號 BKP4002
用途 公司產(chǎn)品僅用物科研
包裝規(guī)格 50次
純度 %
CAS編號
是否進口

本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

技術服務內(nèi)容:

實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號

牛莫拉氏菌PCR檢測試劑盒說明書

Moraxella bovisPCR

BKP4002

PCR實驗方法步驟:

方法
1
:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix
2mM             
4 μl     
引物110pM                 
2 μl     
引物210pM                 
2 μl     Taq
2U/μl               
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl  
1 μl     
ddH2O 50 μl  
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2
:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93 40s → 58 30s → 72 60s,循環(huán)30-35次,在72 7min
3
:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4待電泳檢測或-20長期保存。
4
PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
引物擴增跨度: 200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.11umol10100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
IL5 Protein Canine 重組狗 IL5 蛋白 (His 標簽)HISTOCHOICETISSUEFIXATIVEWITH18%ALCOHOL組織固定劑組織學級無色至微黃無混濁液體RTsigma

人毛發(fā)基質細胞(HHZMC)( 5×105 ) mRTEC, 小鼠腎小管上皮細胞 Mouse1,4-二溴-2- 1,4-DibroMo-2-butqnq;trcns-1,4-DibroMo-2-butqnq 1981/6/7

非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS5A;Vero-HCV-NS5A3,5-二氧基本加醋酯 Mqthyl 3,5-dimqthoxybqnzoctq 120-37-0

人骨骼肌細胞 (HSkMC)( 5×105 )等離子體氧化酶,英文名或英文縮寫:PAO,級別:BR50u/mg,規(guī)格:10

CL-0243WI-38(人胚肺細胞)5×106cells/瓶×2BAIRD-PARKER瓊脂基礎Baird-Parker Agar Ba
FCER2 Others Rat
大鼠 CD23 / FCER2 / FCER2A 人細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸米諾環(huán)素(標準品)Minocycline hydrochloride質量規(guī)格:>98%,BR

中國倉鼠卵巢細胞;CTLA4 Ig-24鹽酸米托蒽醌(進分)Mitoxantrone HCl質量規(guī)格:進分sigma M6545

HLF-02細胞,人胚肺二倍體細胞 大鼠肝星形細胞,CFSC-3H & 5H細胞 CM-M120小鼠角膜上皮細胞完全培養(yǎng)基100mL鹽酸米托蒽醌Mitoxantrone HCl質量規(guī)格:>98%,USP,可用于細胞培養(yǎng)

SK-Hep-1(人細胞) 5×106cells/瓶×2鹽酸米托蒽醌(標準品)Mitoxantrone HCl質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品

HUVEC-c pooled 混合來源的人臍內(nèi)皮細胞(HUVEC) 500,000cells 腸粘膜上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105(1ml)咪唑立賓Mizoribine質量規(guī)格:>98%,細胞培養(yǎng)級
牛莫拉氏菌PCR檢測試劑盒說明書TNFSF15 Others Rat 大鼠 TNFSF15 / TL1A 人細胞裂解液 (陽性對照) 貝那普利拉/苯那普利拉(標準品)Benazeprilat質量規(guī)格:供HPLC法系統(tǒng)適用性試驗用

人微內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL奧美拉唑硫化物Omeprazole Sulfide質量規(guī)格:美國進口

MLTC-1細胞,小鼠間質細胞瘤細胞 KG-1(細胞) 人惡性色素瘤細胞;A-375 [A375]6-羥基氯唑沙宗6-Hydroxy Chlorzoxazone質量規(guī)格:美國進口

CX3CL1 Protein Human 重組人 Fractalkine / CX3CL1 蛋白 (His 標簽)6-嘌呤6-Mercaptopurine質量規(guī)格:美國進口

SV-HUC-1(人膀胱上皮永生化細胞) 5×106cells/瓶×2 甲型 H3N2 (A/Hong Kong/1/1968) 核蛋白 (Nucleoprotein / NP) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 7-甲基-6-嘌呤7-Methyl-6-Mercaptopurine質量規(guī)格:美國進口
QGY-7701
細胞,細胞 人宮頸上皮細胞癌,Ski細胞 KM小鼠子瘤株;U27伊潘立酮-d3質量規(guī)格:美國進口Iloperidone-d3

小鼠結締組織L細胞株929克隆;L-929 [L929]亞胺培南一水合物質量規(guī)格:美國進口Imipenem Monohydrate

ULBP1 Others Human ULBP1 / N2DL1 人細胞裂解液 (陽性對照) 5-羥基吲達帕胺質量規(guī)格:美國進口5-Hydroxy Indapamide

人上皮細胞裂解物HBEpiCL脫氫吲達帕胺質量規(guī)格:美國進口Dehydro Indapamide

IL23R Others Cynomolgus 食蟹猴 IL23R / IL23 Receptor 人細胞裂解液 (陽性對照) CHPS-Na;3--2-羥基丙磺酸鈉質量規(guī)格:>98.5%CHPS-Na

特點優(yōu)勢:
1. 特異性:牛莫拉氏菌PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
 2.   
重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%
3.   
靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4.   
實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5.   
優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果。


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