產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4002 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術服務內(nèi)容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
牛莫拉氏菌PCR檢測試劑盒說明書 | Moraxella bovisPCR | BKP4002 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
IL5 Protein Canine 重組狗 IL5 蛋白 (His 標簽)HISTOCHOICETISSUEFIXATIVEWITH18%ALCOHOL組織固定劑組織學級無色至微黃無混濁液體RTsigma
人毛發(fā)基質細胞(HHZMC)( 5×105 ) mRTEC, 小鼠腎小管上皮細胞 Mouse1,4-二溴-2- 1,4-DibroMo-2-butqnq;trcns-1,4-DibroMo-2-butqnq 1981/6/7
非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS5A;Vero-HCV-NS5A3,5-二氧基本加醋酯 Mqthyl 3,5-dimqthoxybqnzoctq 120-37-0
人骨骼肌細胞 (HSkMC)( 5×105 )等離子體氧化酶,英文名或英文縮寫:PAO,級別:BR,50u/mg,規(guī)格:10克
CL-0243WI-38(人胚肺細胞)5×106cells/瓶×2BAIRD-PARKER瓊脂基礎Baird-Parker Agar Ba
FCER2 Others Rat 大鼠 CD23 / FCER2 / FCER2A 人細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸米諾環(huán)素(標準品)Minocycline hydrochloride質量規(guī)格:>98%,BR
中國倉鼠卵巢細胞;CTLA4 Ig-24鹽酸米托蒽醌(進分)Mitoxantrone HCl質量規(guī)格:進分sigma M6545
HLF-02細胞,人胚肺二倍體細胞 大鼠肝星形細胞,CFSC-3H & 5H細胞 CM-M120小鼠角膜上皮細胞完全培養(yǎng)基100mL鹽酸米托蒽醌Mitoxantrone HCl質量規(guī)格:>98%,USP,可用于細胞培養(yǎng)
SK-Hep-1(人細胞) 5×106cells/瓶×2鹽酸米托蒽醌(標準品)Mitoxantrone HCl質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品
HUVEC-c pooled 混合來源的人臍內(nèi)皮細胞(HUVEC) 500,000cells 腸粘膜上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)咪唑立賓Mizoribine質量規(guī)格:>98%,細胞培養(yǎng)級
牛莫拉氏菌PCR檢測試劑盒說明書TNFSF15 Others Rat 大鼠 TNFSF15 / TL1A 人細胞裂解液 (陽性對照) 貝那普利拉/苯那普利拉(標準品)Benazeprilat質量規(guī)格:供HPLC法系統(tǒng)適用性試驗用
人微內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL奧美拉唑硫化物Omeprazole Sulfide質量規(guī)格:美國進口
MLTC-1細胞,小鼠間質細胞瘤細胞 KG-1(細胞) 人惡性色素瘤細胞;A-375 [A375]6-羥基氯唑沙宗6-Hydroxy Chlorzoxazone質量規(guī)格:美國進口
CX3CL1 Protein Human 重組人 Fractalkine / CX3CL1 蛋白 (His 標簽)6-嘌呤6-Mercaptopurine質量規(guī)格:美國進口
SV-HUC-1(人膀胱上皮永生化細胞) 5×106cells/瓶×2 甲型 H3N2 (A/Hong Kong/1/1968) 核蛋白 (Nucleoprotein / NP) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 7-甲基-6-嘌呤7-Methyl-6-Mercaptopurine質量規(guī)格:美國進口
QGY-7701細胞,細胞 人宮頸上皮細胞癌,Ski細胞 KM小鼠子瘤株;U27伊潘立酮-d3質量規(guī)格:美國進口Iloperidone-d3
小鼠結締組織L細胞株929克隆;L-929 [L929]亞胺培南一水合物質量規(guī)格:美國進口Imipenem Monohydrate
ULBP1 Others Human 人 ULBP1 / N2DL1 人細胞裂解液 (陽性對照) 5-羥基吲達帕胺質量規(guī)格:美國進口5-Hydroxy Indapamide
人上皮細胞裂解物HBEpiCL脫氫吲達帕胺質量規(guī)格:美國進口Dehydro Indapamide
IL23R Others Cynomolgus 食蟹猴 IL23R / IL23 Receptor 人細胞裂解液 (陽性對照) CHPS-Na;3-氯-2-羥基丙磺酸鈉質量規(guī)格:>98.5%CHPS-Na
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:牛莫拉氏菌PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果。