產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4009 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
【產(chǎn)品名稱】: 小鼠病毒PCR檢測試劑盒直銷
【英文名稱】: Mouse Leukemia Virus(MLV)RTPCR
【貨號】: BKP4009
【儲存條件及有效期】:
-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融,有效期6個月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運輸】
u 樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
u 存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(最多凍融3次);
u 運輸:采用冰壺或泡沫箱加冰密封進行運輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑,如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒,也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。
組成及試劑配制:
酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
小鼠病毒PCR檢測試劑盒直銷其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學(xué)中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。
人平滑肌細胞完全培養(yǎng)基 100mL錄代十六烷shēng huà shì jì容量:保存:-20℃250毫克
U251細胞,人星形細胞 志賀氏菌 二氫葉酸還原酶缺陷型中國倉鼠卵巢細胞;CHO/dhFr-2,4-二錄本全 2,4-Dichlorobqnzcldqhydq 874-4-0
CXCL13 Protein Canine 重組狗 CXCL13 / BCA-1 蛋白 (His 標(biāo)簽)氧化發(fā)酵試驗(OF)培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量:25克
NAMALWA(人Butt's瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 甲型 H5N1 (A/chicken/VietNam/NCVD-016/2008) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 克雷伯氏顯色培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量:RT支
大鼠肝細胞;BRL57264-46-72-錄-6-甲基芐胺, 97%2-CHLORO-6-metxYLBENZYLAMINE
ERBB4 Others Human 人 ErbB4 / HER4 人細胞裂解液 (陽性對照) 鋅標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml,基體:1mol/L HNO3)Zinc standard質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml,基體:1mol/L HNO3
小鼠紋狀體神經(jīng)元MN-s鋅標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,,基體:1%HNO3)Zinc standard質(zhì)量規(guī)格:100μg/ml,,基體:1%HNO3
HAVCR2 Others Mouse 小鼠 TIM3 / HAVCR2 人細胞裂解液 (陽性對照) 蚜滅1標(biāo)準(zhǔn)溶液(0.100mg/ml) Vamidothion standard solution質(zhì)量規(guī)格:0.100mg/ml
人胚;MRC-5優(yōu)級真空泵油(Viscosity Grade 46)Vacuum pump oil質(zhì)量規(guī)格:Viscosity Grade 46
DMS153細胞,人小細胞細胞 大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞,PC12細胞 CM-H127人晶狀體上皮細胞完全培養(yǎng)基100mL優(yōu)級真空泵油(Viscosity Grade 68)Vacuum pump oil質(zhì)量規(guī)格:Viscosity Grade 68
293來源病毒包裝細胞;ΦA-GP 人成纖維細胞完全培養(yǎng)基 100mL壬基-β-D-葡萄吡喃糖甙(>98%,BC)Nonyl β-D-glucopyranoside質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC
人癌細胞;MDA-MB-468N-芐氧羰基-L-谷氨酰胺Z-Gln-OH質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
人脂肪細胞-皮下(HPA-s)(1×106 )N-CBZ-L-丙氨酸CBZ-L-Gly質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
CM-R080大鼠大隱內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基100mL鹽酸丙美卡因Proparacaine HCl質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
C3H/An小鼠結(jié)締組織細胞(L929-TK-);LTK- 小鼠腸平滑肌細胞完全培養(yǎng)基 100mLN-芐氧羰基-L-絲氨酸Z-Ser-OH質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR
小鼠病毒PCR檢測試劑盒直銷BT-20(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2 人肺動脈平滑肌細胞HPASMC(E/Z)-N,N-二去甲基-4-羥基它莫西芬質(zhì)量規(guī)格:美國進口(E/Z)-N,N-Didesmethyl-4-hydroxy Tamoxifen
人視網(wǎng)膜色素上皮細胞總RNAHRPEpiC NA4'-羥基它莫西芬質(zhì)量規(guī)格:美國進口4'-Hydroxy Tamoxifen
ARG1 Others Human 人 Arginase-1 / ARG1 人細胞裂解液 (陽性對照) β-羥基它莫西芬質(zhì)量規(guī)格:美國進口β-Hydroxy Tamoxifen
MG-63 人成細胞順式-β-羥基它莫西芬質(zhì)量規(guī)格:美國進口cis-β-Hydroxy Tamoxifen
CL-0385MFC-GFP(小鼠前細胞(綠色熒光蛋白標(biāo)記))5×106cells/瓶×2(S)-鹽酸樂卡地平質(zhì)量規(guī)格:美國進口(S)-Lercanidipine Hydrochloride
PCR檢測試劑盒
小鼠病毒PCR檢測試劑盒直銷 (一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20oC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。