|
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號(hào) | BKP4142 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50次 |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過(guò)與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 貨號(hào) |
副病毒4型PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū) | Parainfluenza Virus 4a (PIV4a)4aRTPCR | BKP4142 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì)：
1. 特異性：副病毒4型PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過(guò)GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì)，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè)，特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證，重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性：該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè)，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí)，可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè)，無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
4. 實(shí)用性：檢測(cè)范圍廣，涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌，可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè)，整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2：該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證，確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長(zhǎng)度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
2,2-Bis(hydroxymethyl)butyric acid 10097-02-6 中文名：2,2-二羥甲基丁酸 分子式：C6H12O4 FTFungalDNAKit 100T
1,3-Bis(4,5-dihydro-2-oxazolyl)benzene 34052-90-9 中文名：1,3-雙(4,5-二氫-2-惡唑)苯 分子式：C12H12N2O2 十六烷基基溴化胺 50g
4,4'-Cyclohexylidenebisphenol 843-55-0 中文名：4,4'-環(huán)亞己基雙苯酚 分子式：C18H20O2 CTAB 250g
2,2'-Dithiobisbenzanilide 135-57-9 中文名：2,2'-二苯甲酰氨基二苯二硫 分子式：C26H20N2O2S2 5’-三0酸胞苷三鹽 50mg
Dimethylolurea 140-95-4 中文名：雙羥甲脲 分子式：C3H8N2O3 CTP 100mg
RabbitE-SelectinELISAKit兔子E選擇素(E-Selectin/CD62E)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 2-Acetylfluorene 781-73-7 中文名：2-乙酰芴 分子式：C15H12O
rabbitEsadiol,E2ELISAKit兔子雌二醇(E2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 2-Amino-2'-chloro-5-nitro benzophenone 2011-66-7 中文名：2-氨基-5-硝基-2'-氯二苯甲酮 分子式：C13H9ClN2O3
rabbitEsadiol,E2ELISAKit 兔子雌二醇(E2)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝 2-Acetamidothiazole 中文名：2-乙酰氨基噻唑 分子式：C5H6N2OS 度：99.0%
RabbitEpidermalgrowthfactor,EGFELISAKit兔子表皮生長(zhǎng)因子(EGF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 2-Acetyl-3-ethylpyrazine 32974-92-8 中文名：2-乙?；?/span>-3-乙基吡嗪 分子式：C8H10N2O
RabbitEpidermalgrowthfactor,EGFELISAKit 兔子表皮生長(zhǎng)因子(EGF)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝 2-Acetylfluorene 中文名：2-乙酰芴 分子式：C15H12O 度：98.0%
副病毒4型PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS5A;Vero-HCV-NS5A腐草霉素質(zhì)量規(guī)格：≥97%,進(jìn)分Phleomycin
ERBB4 Others Human 人 ErbB4 / HER4 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 寡霉素質(zhì)量規(guī)格：>92%,進(jìn)分Oligomycin, from Streptomyces
小鼠紋狀體神經(jīng)元MN-s紡錘菌素質(zhì)量規(guī)格：≥98%,進(jìn)分Netropsin dihydrochloride
HAVCR2 Others Mouse 小鼠 TIM3 / HAVCR2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 頭孢菌素C鋅鹽質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Cephalosporin C zinc salt
人胚;MRC-5精胺氮氧化加合物質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Spermine NONOate
人肺鱗癌細(xì)胞;NCI-H520二本基脲，英文名或英文縮寫(xiě)：Dipxenylcartazide，級(jí)別：高，規(guī)格：100毫克
CD38 Others Rat 大鼠 SCARB3 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 3-環(huán)已安基-2-羌基炳磺醋 (CAPSO) 3-(Cyclohqxylcmino)-2-xy7noxy-1-propcnqsulfonic ccid 73463-39-2
狗骨髓間質(zhì)干細(xì)胞 The dog bone marrow mesenchymal stem cellsIODOACETAMIDE代乙酰胺蛋白組學(xué)級(jí)米白色至黃色結(jié)晶粉末RTsigma
U87MG細(xì)胞，人惡性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 雜色曲霉 人氣管上皮細(xì)胞RNAHTEpiC miRNA5 μgTEBUFFERPH8.0TE緩沖液生物技術(shù)級(jí)100MLRT
SF17(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×21277-49-21-二茂鐵基乙醇1-(Ferrocenyl)ethanol
