產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4155 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
致病性大腸桿菌通用PCR檢測試劑盒供應 | Pathogenic E.coliPCR | BKP4155 |
技術服務內(nèi)容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:致病性大腸桿菌通用PCR檢測試劑盒供應使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
22-Dehydroclerosteryl acetate 28594-00-5 中文名: 分子式:C31H48O2 度:93.0% 關鍵詞: 大葉桂櫻; 豆甾烷; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠琥珀酸脫氫酶elisa試劑盒 小鼠琥珀酸脫氫酶試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠琥珀酸脫氫酶試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠琥珀酸脫氫酶試劑盒、小鼠琥珀酸脫氫酶eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
22-Dehydroclerosterol glucoside 143815-99-0 中文名: 分子式:C35H56O6 度:% 關鍵詞: ; 豆甾烷; 甾苷; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 大鼠凝血因子Ⅷ相關抗原elisa試劑盒 大鼠凝血因子Ⅷ相關抗原試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 大鼠凝血因子Ⅷ相關抗原試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:大鼠凝血因子Ⅷ相關抗原試劑盒、大鼠凝血因子Ⅷ相關抗原eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
22-Dehydroclerosterol 26315-07-1 中文名:22-去氫赤桐甾醇 分子式:C29H46O 度:94.0% 關鍵詞: 抗菌; 豆甾烷; 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 大鼠凝血酶抗凝血酶復合物elisa試劑盒 大鼠凝血酶抗凝血酶復合物試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 大鼠凝血酶抗凝血酶復合物試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:大鼠凝血酶抗凝血酶復合物試劑盒、大鼠凝血酶抗凝血酶復合物eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
21-Deoxyneridienone B 924910-83-8 中文名: 分子式:C21H28O3 度:% 關鍵詞: 孕甾烷; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 大鼠尿激酶型纖溶酶原激活物受體elisa試劑盒 大鼠尿激酶型纖溶酶原激活物受體試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 大鼠尿激酶型纖溶酶原激活物受體試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:大鼠尿激酶型纖溶酶原激活物受體試劑盒、大鼠尿激酶型纖溶酶原激活物受體eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
20-Hydroxyecdysone 5289-74-7 中文名:20-羥基蛻皮甾酮 分子式:C27H44O7 度:98.0% 關鍵詞: ; ; ; 蛻皮甾; 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠呼腸孤病毒3型抗體(RV-3Ab)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
sVE-Cadherin 作用: ELISA 規(guī)格: 96T 奧地利 Bender Otophylloside F 中文名:青陽參苷F 分子式:C48H76O16
Borate,Decahydrate 500g 4,5-Dimethoxy-1-cyanobenzocyclobutane 中文名: 分子式:C11H11NO2
Bite 1kg 4,5-Di-O-caffeoylquinic acid methyl ester 188742-80-5 中文名:4,5-二咖啡??鼘幩峒柞?/span> 分子式:C26H26O12
SOD 3KU Amoxicillin 中文名:阿莫西林 分子式:C16H19N3O5S
Skimmilk 500g Amoxicillin trihydrate 61336-70-7 中文名:羥氨芐青霉素三水合物 分子式:C16H19N3O5S
致病性大腸桿菌通用PCR檢測試劑盒供應大鼠源細胞 Butt's 瘤細胞,NAMALWA細胞 LLC-MK2細胞,綠猴恒河猴腎細胞咪唑煙酸(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標準品Imazapyr acid
Hela, 人細胞系 Human石膽酸(標準品)質(zhì)量規(guī)格:>97(GC),標準品Lithocholic Acid
ADIPOQ Others Mouse 小鼠 ADIPOQ / ACDC / Adiponectin 人細胞裂解液 (陽性對照) 氧嗪酸鉀質(zhì)量規(guī)格:>98%Potassium Oxonate
鐵硒傳遞蛋白 100xITS氧嗪酸鉀(標準品)質(zhì)量規(guī)格:>98%,標準品Potassium Oxonate
ACVR1 Others Canine 狗 ALK-2 / ACVR1 / ALK2 人細胞裂解液 (陽性對照) 綿馬酸ABA(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品Filixic acid ABA
人胚肺二倍體細胞;HEL-1 人胃粘膜上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL大豆分離蛋白shēng huà shì jì容量:RT50克
人滑膜細胞RNAHS miRNA5 μg2 2 4 4 5-五溴聯(lián)本迷 2,2',4,4',5-PqNTcBROMODIPHqNYL qtqr 60348-60-9
LRRN3 Others Human 人 LRRN3 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 檸檬酸shēng huà shì jì容量:5克
牛胚氣管細胞;EB (NBL-4)Φ60mm細胞培養(yǎng)皿shēng huà shì jì容量:2~8℃5克
A172細胞,膠質(zhì)母細胞瘤細胞 ,HepG2細胞 人結(jié)直腸腺癌細胞;COLO 205300-87-83,5-二甲基異唑,97%3,5-Dimetxylisoxazole
反應五要素:
參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。