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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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三日PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
  • 貨號(hào):BKP4186
  • 價(jià)格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-13
  • 更新日期: 2024-11-25
產(chǎn)品詳請(qǐng)
產(chǎn)地 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
品牌 帛科
貨號(hào) BKP4186
用途 公司產(chǎn)品僅用物科研
包裝規(guī)格 50次
純度 %
CAS編號(hào)
是否進(jìn)口

本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:

實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過(guò)與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號(hào)

三日PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書

Plasmodium malariaePCR

BKP4186

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:

方法
1
:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix
2mM             
4 μl     
引物110pM                 
2 μl     
引物210pM                 
2 μl     Taq
2U/μl               
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl  
1 μl     
ddH2O 50 μl  
PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2
:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93 40s → 58 30s → 72 60s,循環(huán)30-35次,在72 7min
3
:伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4待電泳檢測(cè)或-20長(zhǎng)期保存。
4
PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
引物擴(kuò)增跨度: 200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.11umol10100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
2-Aminothiazol-4-acetic acid  中文名:2-氨基噻唑-4-乙酸  分子式:C5H6N2O2S  度:98.0%  小鼠β葡糖苷酶(β-glucosidase)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Ampicillin Trihydrate  中文名:氨芐西林三水酸  分子式:C16H19N3O4S  度:98.0%  小鼠β酚(β-naphthol)LISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝        

2-Acetylfluorene  中文名:2-乙酰芴  分子式:C15H12O  度:98.0%  小鼠β內(nèi)啡肽受體(β-EPR)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

1-Allyl-3,5-Dimethylpyrazole  中文名:1-烯丙基-3,5-二甲基吡唑  分子式:C8H12N2  度:98.0%  小鼠β內(nèi)啡肽(β-EP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

(1R,2S)-2-Amino-1,2-diphenylethanol  中文名:(1R,2S)-2-氨基-1,2-二苯基乙醇  分子式:C14H15NO  度:99.0%  小鼠β甘露糖苷酶(βManase)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝
二氧化快速測(cè)試盒    dioxide rapid test case  α-Spinasterol glucoside  中文名:α-菠甾醇葡萄糖苷  分子式:C35H58O6 

二氫二醇脫氫酶   英文名稱:   Human Dihydrodiol Dehydrogenas 2   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   DDH2  3β-Hydroxyporiferast-5-en-7-one  145163-97-9  中文名:  分子式:C29H48O2 

二硫赤鮮醇   5g  3-Amino-1-phenyl-2-pyrazolin-5-one  中文名:3-氨基-1-苯基-2-吡唑啉-5-  分子式:C9H9N3O  度:98.0%

0酸核糖羧化酶/加氧酶(Rubisco)試劑盒   紫外分光光度法   50/48  4-[(4-Methylpiperazin-1-yl) methyl]benzoic acid di  106261-49-8  中文名:甲磺酸伊馬替尼  分子式:C13H20Cl2N2O2 

0酸核糖羧化酶/加氧酶(Rubisco)試劑盒   紫外分光光度法   25/24  4,9-Dihydroxy-α-lapachone  中文名:  分子式:C15H14O5  度:98.0%
三日PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書WI-38細(xì)胞,人二倍體胚肺細(xì)胞 ,LTEP-a-2細(xì)胞 QBC-939, 人細(xì)胞N-三甲基硅基乙酰胺(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)N-Trimethylsilylacetamide

貓腎細(xì)胞;CRFK1,1,3,3-四甲基二硅氮烷(>97.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC)1,1,3,3-Tetramethyldisilazane

NA Others H1N1 甲型 H1N1 (A/California/04/2009) 神經(jīng)氨酸酶 (Neuraminidase/NA) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 1-(叔丁基二甲硅基)咪唑(>98.0%(T))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)1-(tert-Butyldimethylsilyl)imidazole

CL-0386MPC-11(小鼠漿細(xì)胞瘤)5×106cells/瓶×2N-芐氧羰基-L-谷氨酰胺質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRZ-Gln-OH

EFNB1 Others Rat 大鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) N-CBZ-L-丙氨酸質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRCBZ-L-Gly
EFNA4 Protein Mouse
重組小鼠 Ephrin-A4 / EFNA4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)(Fc 標(biāo)簽)3,3'-二硝基二苯甲酮(>99.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC)3,3'-Dinitrobenzophenone

BE(2)-M17(人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;PA3172,4'-二氟二苯甲酮(>95.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)2,4'-Difluorobenzophenone

人成纖維細(xì)胞HCF4,4'-二氟二苯甲酮(>99.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC)4,4'-Difluorobenzophenone

IL2RG Others Rat 大鼠 IL2RG / CD132 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 1,4-二芐氧基苯(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)1,4-Dibenzoylbenzene

大鼠腸內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL3,3',4,4'-二苯基砜四羧酸二1(>97.0%(HPLC)(T))質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(HPLC)(T)3,3',4,4'-Diphenylsulfonetetracarboxylic Dianhydride

特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:三日PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過(guò)GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%
 2.   
重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3.   
靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
4.   
實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
5.   
優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。


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