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實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱(chēng)和ID號(hào)；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。

實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。 
10×PCR buffer 
5 μl     dNTP mix （2mM） 
4 μl     引物1（10pM） 
2 μl     引物2（10pM） 
2 μl     Taq酶 （2U/μl） 
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 

PCR實(shí)驗(yàn)步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見(jiàn)的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀。混勻后，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí)，先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其完全溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值，測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品：用無(wú)菌注射器抽取受檢者血2mL，注入無(wú)菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽(yáng)性對(duì)照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專(zhuān)用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照到 5 號(hào)管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。

實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，*通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類(lèi)和非探針類(lèi)兩類(lèi)，探針類(lèi)是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類(lèi)是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對(duì)定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR

生成素相關(guān)生長(zhǎng)因子 (AGF)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  Oxiracetam  中文名：奧拉西坦  分子式：C6H10N2O3 

生成素相關(guān)生長(zhǎng)因子   英文名稱(chēng)：   Angiopoietin Growth Factors   英文縮寫(xiě)：   AGF   規(guī)格：   48T/96T  Oxymetholone 434-07-1  中文名：康復(fù)龍  分子式：C21H32O3  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

生成素相關(guān)生長(zhǎng)因子   英文名稱(chēng)：   Angiopoietin Growth Factors   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   AGF  Withaphysalin S  949172-13-8  中文名：  分子式：C29H40O8  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

生成素-2   英文名稱(chēng)：   Angiopoietin-2   英文縮寫(xiě)：   ANG2   規(guī)格：   48T/96T  Oxymetholone  中文名：康復(fù)龍  分子式：C21H32O3 

生成素-2   英文名稱(chēng)：   Angiopoietin-2   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   ANG2  Withaphysalin S  949172-13-8  中文名：  分子式：C29H40O8
CL-0029B16(小鼠色素瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×21-溴-4-(三氟甲氧基)苯(>97.0%(GC))1-Bromo-4-(trifluoromethoxy)benzene質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(GC)

H4細(xì)胞， 大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞,HASMC細(xì)胞 正常大鼠腎細(xì)胞(EGF受體陽(yáng)性);NRK49F4-丁基-4'-羥基查耳酮(>98.0%(HPLC))4-Butyl-4'-hydroxychalcone質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)

BSC-1(猴腎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2(E)-4-羥基-N-去甲基它莫西芬(E)-4-Hydroxy-N-desmethyl Tamoxifen質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

COMP Others Human  COMP 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 4-乙酰氧基它莫西芬4-Acetoxy Tamoxifen質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

二氫葉酸還原酶缺陷型中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞;CHO/dhFr-N-去甲基-4-羥基它莫西芬-d5 (1:1 E/Z 混合物)N-Desmethyl-4-hydroxy Tamoxifen-d5 (1:1 E/Z Mixture)質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口
高致病性H7N9病毒變異株P(guān)CR檢測(cè)試劑盒（熒光PCR法）BABL/C2 BABL/C小鼠胚胎細(xì)胞美羅培南Meropenem trihydrate質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR,三水合物

CL-0174NRK-52E(大鼠腎小管導(dǎo)管上皮細(xì)胞)5×106cells/瓶×2美羅培南(標(biāo)準(zhǔn)品)Meropenem trihydrate質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品,三水合物

MEF, 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞硫酸卡那霉素Kanamycin mono sulfate質(zhì)量規(guī)格：效價(jià)≥750IU/MG,BP,BR

胚腎細(xì)胞-F克隆;293F 腎成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL硫酸卡那霉素(標(biāo)準(zhǔn)品)Kanamycin mono sulfate質(zhì)量規(guī)格：效價(jià)測(cè)定

羊膜上皮細(xì)胞RNAHAmEpiC miRNA5 μg酮舍林1酸鹽Ketanserin Tartrate質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR
7-Benzyloxyindole  中文名：7-芐氧基吲哚  分子式：C15H13NO    大鼠環(huán)0酸鳥(niǎo)苷   英文名稱(chēng)：   Cyclic guanosine monophosphate   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   cGMP

7-Amino-4-methylcoumarin  中文名：7-氨基-4-甲基  分子式：C10H9NO2    乙酰膽堿酯酶（T－CHE）檢測(cè)   Acetylcholine ansferase (ChAT) detection

7-Amino-3-methyl-3-cephem-4-carboxylic acid  中文名：  分子式：C8H10N2O3S    乙酰膽堿轉(zhuǎn)移酶（ChAT）檢測(cè)   Detection of the ache of the choline

7-Acetoxy-4-methylcoumarin  中文名：7-乙酰氧基-4-甲基  分子式：C12H10O4    丁酰膽堿酯酶檢測(cè)   Glucose -6- phosphate dehydrogenase (G-6-PD) detection

7,8-Dimethoxy-1,3-dihydro-2H-3-benzazepin-2-one  中文名：  分子式：C12H13NO3    葡萄糖-6-0酸脫氫酶（G－6－PD）檢測(cè)   BN N-ACETYL-D-GLUCOSAMINIDASE (NAG) detection

本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。