產地 | 進口、國產 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4198 |
用途 | 公司產品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
病毒通用型PCR檢測試劑盒說明書 | Poliovirus(PV)RTPCR | BKP4198 |
技術服務內容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:病毒通用型PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析,經過GenBank及自建龐大數(shù)據庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
2-Cyclopropyl-3-[(diphenylphosphinyl)methyl]-4-(4-fluorophenyl)quinoline 中文名: 分子式:C31H25FNOP λ噬菌體基因組DNA快速提取試劑盒 Fast exaction kit for phage genomic DNA
2-Cyano-N-[4-(Trifluoromethyl)Phenyl]Acetamide 中文名: 分子式:C10H7F3N2O 超土壤基因組DNA快速提取試劑盒 Rapid exaction kit for genomic DNA in soil
2-C-Methyl-D-erythrono-1,4-lactone 中文名: 分子式:C5H8O4 血紅素氧化酶 (HO-1) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝
2-C-Methyl-D-erythritol 中文名:2-C-甲基-D-赤蘚糖醇 分子式:C5H12O4 熱休克蛋白 27(HSP27) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝
2-Chloromethyl-3-methyl-4-(2,2,2-trifluoroethoxy)pyridine 中文名: 分子式:C9H10Cl2F3NO 熱休克蛋白 70(HSP70) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝
海藻糖含量測試盒 可見分光光度法 50管/48樣 Pemetrexed di 357166-30-4 中文名:培美曲塞二鈉 分子式:C21H23N5Na2O6
還原型谷胱甘肽(GSH)測定試劑盒(微板法) 3a-Hydroxy-3,3a,7,7a-tetrahydrobenzofuran-2,6-dione 中文名: 分子式:C8H8O4
還原糖含量測試盒 可見分光光度法 50管/24樣 3-Aminoadamantan-1-ol 中文名: 分子式:C10H17NO 度:98.0%
過氧化物酶體增殖物活化受體γ 英文名稱: Human Peroxisome Proliferators Activated Receptor γ 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: PPARγ 4,5-Dimethoxy-1-cyanobenzocyclobutane 35202-54-1 中文名: 分子式:C11H11NO2
(OC43/HKU1)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T Annonacin 中文名: 分子式:C35H64O7
病毒通用型PCR檢測試劑盒說明書U-2 OS, 人細胞羥基伊曲康唑-d8質量規(guī)格:美國進口Hydroxy Itraconazole-d8
人細胞;HOS 大鼠成纖維細胞完全培養(yǎng)基 100mL丁基伊曲康唑質量規(guī)格:美國進口Butyl Itraconazole
原代骨骼肌細胞培養(yǎng)特制添加劑Many types of cells包裝:5/2.5/1ml丙基伊曲康唑質量規(guī)格:美國進口Propyl Itraconazole
EPHA3 Others Rat 大鼠 EphA3 人細胞裂解液 (陽性對照) 異丙基伊曲康唑質量規(guī)格:美國進口Isopropyl Itraconazole
敘利亞倉鼠腎細胞;BHK-21噴托維林質量規(guī)格:美國進口Carbetapentane
人間充質干細胞-脂肪RNAHMSC-ad miRNA5 μg2′-脫氧胸苷25克
大鼠小神經膠質細胞(RM)(5×105)-2.5-二羧醋97% 2,5-Thiophqnqdiccrboxylic ccid 48-31-9
非洲綠猴腎細胞;CV-1正嶙酸鐵二水物25克
KM小鼠腦神經膠質母細胞瘤瘤株;G422 小鼠膀胱成纖維細胞完全培養(yǎng)基 100mL偏硼酸鈉shēng huà shì jì容量:500克
細胞名稱 種屬60-23-1半胱胺;巰;2-;硫代;2-基乙CysteaMine;Decarboxycysteine;2-AMinoethanethiol;2-AMinoetxylMercaptan;β-MercaptoetxylaMine;ThioethanolaMine;MercaMine; MEA
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。