|
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號(hào) | BKP4209 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50次 |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
豬腸道杯狀病毒PCR檢測(cè)試劑盒直銷 | Porcine Enteric Calicivirus（PECV）RTPCR | BKP4209 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過(guò)與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì)：
1. 特異性：豬腸道杯狀病毒PCR檢測(cè)試劑盒直銷使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過(guò)GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì)，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè)，特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證，重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性：該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè)，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí)，可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè)，無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
4. 實(shí)用性：檢測(cè)范圍廣，涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌，可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè)，整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2：該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證，確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
2-Methylsulfanylpyrimidin-4(3H)-one 5751-20-2 中文名： 分子式：C5H6N2OS 度：98.0% 關(guān)鍵詞： 小鼠可溶性E-選擇素(mouse sE-Selectin/sCD62E) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進(jìn)口分裝
2-Methylanthraquinone 84-54-8 中文名：2-甲基蒽醌 分子式：C15H10O2 度：98.0% 關(guān)鍵詞： 小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
2-Methyl-4-nitrobenzoic acid 1975-51-5 中文名： 分子式：C8H7NO4 度：98.0% 關(guān)鍵詞： 小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9/GelatinaseB)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
2-Methyl-4-(2-methylbenzoylamino)benzoic acid 317374-08-6 中文名： 分子式：C16H15NO3 度：98.0% 關(guān)鍵詞： 小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶8/中性粒細(xì)胞膠原酶(MMP-8)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
2-Methoxystypandrone 85122-21-0 中文名： 分子式：C14H12O5 度：98.0% 關(guān)鍵詞： 虎杖; 萘醌; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù) 小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶7(MMP-7)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
堿性蛋白酶測(cè)試盒 可見(jiàn)分光光度法 50管/24樣 Tetracaine 中文名：鹽酸丁卡因 分子式：C15H25ClN2O2
堿性成纖維生長(zhǎng)因子 英文名稱： basic fibroblast growth factor 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： b-FGF 4,4'-Bis(diethylamino)benzophenone 90-93-7 中文名：四乙基米氏酮 分子式：C21H28N2O
堿性0酸酶（AKP）檢測(cè) Acid phosphatase (ACP) detection Polypodine B 中文名：水龍骨甾酮B 分子式：C27H44O8
甲狀腺球蛋白抗體 英文名稱： Human Thyroglobulin Aibody 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： TGAb Pefloxacin mesylate 70458-95-6 中文名：甲磺酸培氟沙星 分子式：C18H24FN3O6S
甲型H5N1 英文名稱： Influenza A H5N1(Avian Flu) HA 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： H5N1 HA Prosapogenin A 19057-67-1 中文名：薯蕷次皂苷A 分子式：C39H62O12 度：% 關(guān)鍵詞： 細(xì)胞毒活性; 麥冬; 螺甾烷; 甾苷; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)
豬腸道杯狀病毒PCR檢測(cè)試劑盒直銷TNFRSF17 Others Human 人 TNFRSF17 / BCMA / CD269 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 黃芪多糖(50%)質(zhì)量規(guī)格：>50%2-(Chloromethyl)-4-(4-Nitrophenyl)-1,3-thiazole
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;3T6-Swiss albino黃芪多糖(30%)質(zhì)量規(guī)格：>30%2-(Chloromethyl)-4-(4-Nitrophenyl)-1,3-thiazole
SAE1 Others Human 人 SAE1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 3-奎寧環(huán)酮鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格：>98%3-Quinuclidinone HCl
QGY-7701, 人細(xì)胞伊索拉定質(zhì)量規(guī)格：≥99%,BRIrsogladine
NSC，大鼠神經(jīng)干細(xì)胞 人腦視神經(jīng)細(xì)胞，Hs 683細(xì)胞 RF/6A(猴脈絡(luò)膜-視網(wǎng)膜(內(nèi)皮)細(xì)胞)黃柏酮（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Obacunone
PDIA4 Others Human 人 ERP72 / PDIA4 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) Camphore2-莰酮100克CP，96%
C57BL/6小鼠骨髓間質(zhì)干細(xì)胞 C57BL/6 mouse bone marrow mesenchymal stem cells芐基三基錄化銨;三基下基錄化銨 BqnzyltriMqthylcMMoniuM chloridq 26-93-9
HME6細(xì)胞，人色素瘤細(xì)胞 動(dòng)物雙歧桿菌 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KMY0919 10B Naphthol Blue Black (for electrophores... 1064-48-8 5G 染色劑
UMR-106(大鼠細(xì)胞) 5×106cells/瓶×24-(對(duì)硝基本偶氮)-1-奈酚，英文名或英文縮寫：4-(4-nitnopxenylazo)-1-naphthol，級(jí)別：高，50%，規(guī)格：5克
Hut-102(人皮膚T瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 SKOV3/Taxol-25, 人紫杉醇耐藥細(xì)胞株 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KMY1022MacerozymeR-10 1g/5g/10g/100g原裝 Yakult.JAPAN
反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長(zhǎng)度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
