產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4166 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
皺褶青霉PCR檢測試劑盒說明書 | Penicillium rugulosumPCR | BKP4166 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:皺褶青霉PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
2-Amino-2'-chloro-5-nitro benzophenone 中文名:2-氨基-5-硝基-2'-氯二苯甲酮 分子式:C13H9ClN2O3 內(nèi)皮生長因子D 英文名稱: vascuiar endothelial growth factor D 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: VEGF-D
2-Amino-2',5-dichlorobenzophenone 中文名:2-氨基-2',5-二氯二苯酮 分子式:C13H9Cl2NO 內(nèi)皮生長因子165 英文名稱: vascuiar endothelial growth factor 165 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: VEGF165
2-Allylphenol 中文名:2-烯丙基酚 分子式:C9H10O 內(nèi)皮生長因子 D(VEGF-D) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝
2-Acetylfluorene 中文名:2-乙酰芴 分子式:C15H12O 內(nèi)皮生長因子 165(VEGF165) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝
2-Acetylbutyrolactone 中文名:2-乙?;?nèi)酯 分子式:C6H8O3 內(nèi)皮生長因子受體 1(VEGF-R1) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝
超氧化物歧化酶(SOD)分型測試盒(羥胺法) Polyhydroxybutyrate 中文名:聚羥基丁酸酯 分子式:C12H20O7
超氧化物歧化酶 30KU Amoxicillin 中文名:阿莫西林 分子式:C16H19N3O5S 度:98.0%
超微量Na+K+–ATP酶測定試劑盒 Precursor of cefcapene diisopropylanmine salt 153012-37-4 中文名: 分子式:C28H42N6O8S2 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
超微量Na+K+–ATP酶測定試劑盒 Pitavastatin calcium 147526-32-7 中文名:匹伐他汀鈣 分子式:C50H46CaF2N2O8
超微量Ca-ATP酶測定試劑盒 Aurantio-obtusin 中文名:橙黃決明素 分子式:C17H14O7 度:99.0%
皺褶青霉PCR檢測試劑盒說明書大鼠肝星形細胞RHSteC來曲唑(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Letrozole
NCI-H596[H596]細胞,人細胞 人細胞,SK-RC-42細胞 人肝星形細胞HHSteC醋酸亮丙瑞林質(zhì)量規(guī)格:>97%.BRLeuprorelin Acetate (Leuprolide Acetate)
小香豬皮膚細胞;SSC-S2氟米龍醋酸酯質(zhì)量規(guī)格:>97%Fluorometholone Acetate
NCR3 Others Human 人 NKp30 人細胞裂解液 (陽性對照) 十溴二苯質(zhì)量規(guī)格:>98%Pentabromophenyl ether
CM-R068大鼠腎小管平滑肌細胞完全培養(yǎng)基100mL氨基雜環(huán)鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格:>98%3-Amino-3-azabicyclo[3.3.0]octane hydrochloride
KG-1細胞,細胞 人細胞,Hep3B2.1-7細胞 CL-0032BEL-7404(人細胞)5×106cells/瓶×2川楝素(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Toosendanin
敘利亞倉鼠腎細胞;BHK-21川芎嗪(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Tetramethylpyrazine
F11R Others Human 人 JAM-A 人細胞裂解液 (陽性對照) 川芎嗪質(zhì)量規(guī)格:≥98%,BRTetramethylpyrazine
外周血白細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)川續(xù)斷皂苷VI;木通皂苷D(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Asperosaponin Ⅵ
CD300A Others Human 人 CD300A / CMRF-35H / IGSF12 人細胞裂解液 (陽性對照) 赤芝酸E質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥97%Lucidenic acid E
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應(yīng)嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。