產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4179 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
鴿副粘病毒PCR檢測試劑盒供應(yīng) | Pigeon Paramyxovirus(PPMV)RTPCR | BKP4179 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。
2-Amino-5-nitrothiazole 121-66-4 中文名:2-氨基-5-硝基噻唑 分子式:C3H3N3O2S 度:98.0% 小鼠環(huán)孢素A(CsA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
2-Amino-5-nitrobenzophenone 1775-95-7 中文名:2-氨基-5-硝基二苯甲酮 分子式:C13H10N2O3 度:98.0% 小鼠環(huán)0酸腺苷(mouse cAMP) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝
2-Amino-5-mercapto-1,3,4-thiadiazole 2349-67-9 中文名:2-氨基-5-巰基-1,3,4-噻二唑 分子式:C2H3N3S2 度:98.0% 小鼠環(huán)0酸鳥苷(mouse cGMP) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝
2-Amino-5-chlorobenzophenone 719-59-5 中文名:2-氨基-5-氯二苯甲酮 分子式:C13H10ClNO 度:99.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(mouse CF) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝
2-Amino-4-phenylphenol 1134-36-7 中文名:2-氨基-4-苯基苯酚 分子式:C12H11NO 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠可溶性CD36分子(mouse sCD36) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝
單增李斯特菌(LM)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T Topiramate 中文名:托吡酯 分子式:C12H21NO8S
大鼠中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)ELISAKit ELISA. 96T/48T Tiotropium bromide 中文名:噻托溴銨 分子式:C19H22NO4S2
大鼠幽門螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISAKit ELISA. 96T/48T Tiotropium bromide 136310-93-5 中文名:噻托溴銨 分子式:C19H22NO4S2 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
大鼠乙酰膽堿受體抗體(AChRab)ELISAKit ELISA. 96T/48T Toltrazuril 69004-03-1 中文名:托曲珠利 分子式:C18H14F3N3O4S
大鼠氧化酶 英文名稱: Xahine oxidase 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: XOD Otophylloside O 中文名: 分子式:C56H84O20
鴿副粘病毒PCR檢測試劑盒供應(yīng)表達(dá)SV40T和EBNA1的人胚腎細(xì)胞;293ET5-O-去甲多奈哌齊質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口5-O-Desmethyl Donepezil
KC細(xì)胞,人細(xì)胞 小鼠腦神經(jīng)瘤細(xì)胞,Neuro-2a[N2a;Neuro-2a]細(xì)胞 CL-0373KiMA(人胚腎上皮細(xì)胞系)5×106cells/瓶×2二氫多奈哌齊(非對映)質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Dihydro Donepezil (Mixture of Diastereomers)
BGC-803(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2Dehydrodeoxy多奈哌齊(多奈哌齊雜質(zhì))質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Dehydrodeoxy Donepezil (Donepezil Impurity)
HWP-c subcutaneous 人類白前脂肪細(xì)胞(HWP)皮下 500,000cells 人成纖維細(xì)胞HLF脫氧鹽酸多奈哌齊質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Deoxy Donepezil Hydrochloride
615小鼠狀肺腺株;P615鹽酸地芬尼多雜質(zhì)(1化合物)(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:供檢查用Alkene
HBZY-1(大鼠腎小球系膜細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2硅膠板H500毫克2~8℃
ASGR1 Others Mouse 小鼠 ASGPR1 / ASGR1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 5-溴-4-錄-3-吲哚鱗醋酯隊(duì)本安鹽 (BCIP)(-20℃) 5-Bromo-4-chloro-3-indolyl phosphctq p-toluidinq sclt 6278-6-9
人胚胎,皮膚,肌肉;M-22FMOC-L-谷酰胺25克
PPARG Others Human 人 PPARG / Nr1c3 / PPARgamma 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 結(jié)核冷染液shēng huà shì jì容量:1米
興國鯉尾鰭細(xì)胞;XGLRNaseA 25mg/100mg Sigma分裝
特點(diǎn)優(yōu)勢:
1. 特異性:鴿副粘病毒PCR檢測試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時(shí)。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。