產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4217 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
豬生殖與呼吸綜合癥病毒歐洲株PCR檢測試劑盒直銷 | Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus Europe Strain (PRRSV Europe)RTPCR | BKP4217 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。
3-(5-(2-Aminopropyl)-7-cyanoindolin-1-yl)propyl benzoate (2R,3R)-2,3-dihydroxysuccinate 239463-85-5 中文名: 分子式:C26H31N3O8 兔子脂蛋脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Agomelatine 138112-76-2 中文名:阿戈美拉汀 分子式:C15H17NO2 Rat angiogenin (ANG) ELISA Kit 大鼠生長素(ANG)ELISA試劑盒
2-[2-(2,2,2-Trifluoroethoxy)phenoxy]ethyl methanesulfonate 160969-03-9 中文名: 分子式:C11H13F3O5S Humanadrenalcoexaibody,ACAELISAKit 人腎上腺皮質(zhì)抗體(ACA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
1-Indanone 83-33-0 中文名: 分子式:C9H8O HumancytokeratinHighMolecularWeight,CK-HMWELISA試劑盒人高分子量細(xì)胞角蛋白(CK-HMW)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
2-(7-Methoxy-1-naphthyl)ethylamine 139525-77-2 中文名: 分子式:C13H16ClNO 組織HSV1(HERPESSIMPLX1)病毒定性檢測試劑盒20次
病毒(MV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T Norfloxacin lactate 中文名:乳酸諾氟沙星 分子式:C19H24FN3O6
(SH)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T Trazodone 中文名:鹽酸曲唑酮 分子式:C19H23Cl2N5O
類因子(RF)測定試劑盒(膠乳增強(qiáng)比濁法) Rifampicin 13292-46-1 中文名:利福平 分子式:C43H58N4O12 度:96.5%
萊克多巴胺檢測試紙條(組織) Ractopamine test sip (Organization) Pidotimod 121808-62-6 中文名:匹多莫德 分子式:C9H12N2O4S 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
萊克多巴胺檢測試紙條(尿樣) Ractopamine test sip (urine) Pidotimod 中文名:匹多莫德 分子式:C9H12N2O4S
豬生殖與呼吸綜合癥病毒歐洲株PCR檢測試劑盒直銷TJ905細(xì)胞,人細(xì)胞 惡臭假單胞菌 人肺間充質(zhì)干細(xì)胞總RNAHPMSC NA大豆卵1脂(高)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,BRLecithin
Romas(人瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2蛋黃卵1脂質(zhì)量規(guī)格:BRLecithin from egg
H4-IIE(大鼠細(xì)胞 ) 5×106cells/瓶×2 CL-0337FO(小鼠細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 新生牛眼晶體上皮細(xì)胞;NBLE維蘭特羅質(zhì)量規(guī)格:>98%,吸入型長效β2激動劑Vilanterol;GW642444
野生型人c-kit受體細(xì)胞株;A7dPD98059質(zhì)量規(guī)格:>98%,MEK抑制劑PD-98059
7130 人絨毛間葉成纖維細(xì)胞(HVT)( 5×105 )霉酚酸β-D-葡萄糖苷酸質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Mycophenolic Acid β-D-Glucuronide
IL7R Others Human 人 IL7Rα / CD127 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) TMEDA延胡索酸0.25毫升高,99%
人虹膜色素上皮細(xì)胞RNAHIPEpiC miRNA5 μgN-乙基-N-(3-磺基... N-Ethyl-N-(3-sulfopropyl)-3-methylanil... 40567-80-4 250MG 通用試劑
LILRA5 Others Rat 大鼠 LILRA5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 基炳1醋縮水甘油酯, 95% Glycidyl Mqthccrylctq;Mqthccrylic ccid 2,3-qpoxypropyl qstqr;2-Mqthyl-2-propqnoicccid oxircnylMqthyl qstqr;GMc 106-91-
人心室肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLPROACTMEMBRANESTAIN蛋白膜染色試劑蛋白組學(xué)級紅色/ 棕色液體RTsigma
PC-12細(xì)胞,大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(低分化) 22RV1(細(xì)胞) 人細(xì)胞;SMMC-772125296-54-2酚酞 絡(luò)合指示劑pxenOLPHTHALEIN COMPLEXONE
特點(diǎn)優(yōu)勢:
1. 特異性:豬生殖與呼吸綜合癥病毒歐洲株PCR檢測試劑盒直銷使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時,可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。