產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4222 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
豬輪狀病毒通用PCR檢測試劑盒說明書 | Porcine rotavirus RTPCR | BKP4222 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:豬輪狀病毒通用PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
3,3-Dimethoxy-5α-androstan-17-one 3591-19-3 中文名:3,3-二甲氧基-5α-雄烷-17-酮 分子式:C21H34O3 度:98.0% 小鼠甲狀旁腺激素(PTH)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
3,3',4,4'-Benzophenone tetracarboxylic dianhydride 2421-28-5 中文名:3,3',4,4'-二苯甲酮四甲酸二酐 分子式:C17H6O7 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
3-(tert-Butoxycarbonyl)-2,2-dimethyl-4-phenyloxazolidine-5-carboxylic acid 143527-70-2 中文名: 分子式:C17H23NO5 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠甲基化酶(Methylase)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
3-(Hydroxymethyl)cyclopentanone 113681-11-1 中文名: 分子式:C6H10O2 度:% 關(guān)鍵詞: 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠己糖激酶(HK)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
3-(Hydroxymethyl)cyclopentanol 1007125-14-5 中文名: 分子式:C6H12O2 度:% 關(guān)鍵詞: 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1α 英文名稱: somal-derived factor-1 a 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: SDF-1α
綿羊球蛋白A 英文名稱: Immunoglobulin A 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: IgA 3-Ethoxyandrosta-3,5-dien-17β-ol 中文名:3-乙氧基雄-3,5-二烯-17β醇 分子式:C21H32O2 度:93.0%
綿羊促卵泡生成激素 英文名稱: Follicle Stimulating Hormone 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: FSH 3-Ethyl-4-methyl-3-pyrrolin-2-one 766-36-9 中文名: 分子式:C7H11NO
綿羊白介素2(IL-2)ELISAKit ELISA. 96T/48T Allyl phenoxyacetate 中文名:苯氧乙酸烯丙酯 分子式:C11H12O3
綿羊0酸化腺苷酸活化蛋白激酶elisa試劑盒 綿羊0酸化腺苷酸活化蛋白激酶試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 綿羊0酸化腺苷酸活化蛋白激酶試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:綿羊0酸化腺苷酸活化蛋白激酶試劑盒、綿羊0酸化腺苷酸活化蛋白激酶elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 3-Ethoxyandrosta-3,5-dien-17-one 972-46-3 中文名:3-乙氧基-雄甾-3,5-二烯-17-酮 分子式:C21H30O2
綿羊0酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISAKit ELISA. 96T/48T Allyl phenoxyacetate 中文名:苯氧乙酸烯丙酯 分子式:C11H12O3 度:98.0%
豬輪狀病毒通用PCR檢測試劑盒說明書TFPI Others Mouse 小鼠 TFPI / LACI / EPI 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 2,3-二溴丙酰胺(98%)質(zhì)量規(guī)格:0.982,3-Dibromopropionamide
CL-0127JEG-3(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×2滑石粉(800目)質(zhì)量規(guī)格:800目Talc
IgG Others Rabbit 兔 IgG-Fc (185 Thr/Ala, Asn 284/Ser) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 滑石粉(藥用級,325目)質(zhì)量規(guī)格:藥用級,325目Talc
小鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL硼砂pH標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(硼砂PH(25℃):9.18)質(zhì)量規(guī)格:硼砂PH(25℃):9.18pH standard-Borax
Hepa 1-6小鼠細(xì)胞 Hepa mouse hepatoma cell line 1-6 DMEM+10%FBS(-)-莨菪堿,L-天仙子胺,L-天仙子堿質(zhì)量規(guī)格:>99%(-)-Hyoscyamine
人絨毛間葉成纖維細(xì)胞總RNAHVMF NAGUANIDINExy7noCHLORIDE鹽酸胍技術(shù)級白色至微黃色顆粒結(jié)晶粉末RTsigma
EREG Others Human 人 Epiregulin / EREG 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 氘代炳同-D6 cCqTONq-D6 666-2-4
Eca-109 人細(xì)胞葡聚糖凝膠 Sephade... Sephadex LH-20 Null 25G 分離試劑
CL-0393NCI-H209(人小細(xì)胞細(xì)胞)5×106cells/瓶×2HISTOCHOICETISSUEFIXATIVEWITHOUTALCOHOL組織固定劑組織學(xué)級微黃無混濁液體RTsigma
MA, 小鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞(糖原III)
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。